Pyrobest
DNA Polymerase、
TaKaRa TaqおよびA社Hot start用
Taqを用いて、p53遺伝子5 kbp（テンプレート量：各200 ng）の増幅を行い、比較検討しました。その結果、
TaKaRa TaqおよびA社Hot start用
Taqではターゲット遺伝子を増幅できませんでした。しかし、
Pyrobest DNA Polymeraseでは、Hot start法を用いなくても非特異的な増幅が抑えられ、ターゲット遺伝子が増幅されていることがわかりました。
これは、
TaKaRa Taqと比較して
Pyrobest DNA Polymeraseは至適温度が高いうえ、65℃以下ではポリメラーゼ活性が低く、65℃以上で急激に活性が上昇することによると思われます。
 |
レーン
| 1 |
：Pyrobest DNA Polymerase |
| 2 |
：TaKaRa Taq |
| 3 |
：A社Hot start用Taq |
| M |
：λ-Hind III Marker |
PCR反応条件
| （レーン1, 2） |
| 98℃、10 sec |
30 cycles |
| 68℃、10 min |
| （レーン3） |
| 94℃、10 min（プレインキュベーション） |
| 98℃、10 sec |
30 cycles |
| 68℃、10 min |
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Thermal Cycler ：TakaRa PCR Thermal Cycler MP
ゲル：1% Agarose L03「TAKARA」
アプライ量：8 μl/50 μl
