Pyrobest™ DNA Polymerase

大腸菌8 kbの増幅反応


大腸菌のゲノムDNAを鋳型として8 kbの増幅反応を行った。

Template

JM109ゲノムDNA

:50 ng/50 μl

酵素量

 

Pyrobest

DNA Polymerase

:1.25 U/50 μl

S社DNA Polymerase

:1.25 U/50 μl, 2.5 U/50 μl

PCR反応条件:

 

98℃ 10 sec
68℃ 10 min 


30 cycle

サーマルサイクラー

:TaKaRa PCR Thermal Cycler MP

ゲル

:1% Agarose L03「TAKARA」(製品コード 5003)

アプライ量

:5 μl/50 μl反応液

レーン

1:

Pyrobest

DNA Polymerase/Pyrobest Buffer

2:

Pyrobest

DNA Polymerase/Pyrobest Buffer II

3:

S社DNA Polymerase(1.25 U/50 μl)

4:

S社DNA Polymerase(2.5 U/50 μl)

M:

λ-Hind III digest



Pyrobest

Buffer IIを用いて反応を行うことにより、今までのbufferでの反応に比べて増幅産物量の増大が認められた。また、S社DNA Polymeraseを同量(1.25 U/50 μl)使用した場合の反応よりも増幅産物量は多く、2倍量(2.5 U/50 μl)の場合と同程度の増幅産物量が認められた。

  Pyrobest™ DNA Polymerase