T4 RNA Ligase

T4 RNA LigaseによるRNA(30mer)のLigation <酵素量の検討>

基質RNA:5'(P)-CGCCAGGGUUUUCCCAGUCACGACGUUGUA-3'


基質RNA(30 mer) 5 μg
10×T4 RNA Ligase Buffer 5 μl
0.1% BSA 3 μl
T4 RNA Ligase 0~50 U
PEG #6000(60%) 21 μl
滅菌精製水 up to 50 μl



|――― 16℃、16時間インキュベート


6% Agarose電気泳動(図1)

図1
 Lane 1:T4 RNA Ligase 0 U
 Lane 2:T4 RNA Ligase 5 U
 Lane 3:T4 RNA Ligase 10 U
 Lane 4:T4 RNA Ligase 20 U
 Lane 5:T4 RNA Ligase 30 U
 Lane 6:T4 RNA Ligase 40 U
 Lane 7:T4 RNA Ligase 50 U
図1 T4 RNA LigaseによるRNA(30mer)のLigation

  T4 RNA Ligase