PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit

増幅鎖長の確認(2ステップRT-PCR)
PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit(製品コード R023A)

ヒト心臓由来total RNAを鋳型として、Dystrophin遺伝子の様々な長さの領域を2ステップRT-PCRで増幅しました。

【方法】

total RNA 1 μg/20 μl反応系で逆転写反応(oligo dT Primerを使用)を行い、そのうち5 μlを鋳型として50 μl反応系(total RNA 250 ng相当/50 μl PCR反応系)で下記条件のPCRを行った。
 
PCR条件:
6 kb 以下   8 kb 以上  
98℃ 10 sec.
 
30 cycles 98℃ 10sec.
 
30 cycles
60 or 55℃ 15 sec. 68℃ 1 min./kb
68℃ 1 min./kb 

【結果】

13.5 kbまで良好な伸長と増幅が確認できた。
 

  PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit