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  PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit（製品コード R023A）

増幅鎖長の確認（1ステップRT-PCR）
PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit（製品コード R023A）

【方法】

ヒト心臓由来total RNAまたはHL60細胞由来のtotal RNAを鋳型として（100 ng/50 μl反応系）、ターゲット遺伝子の様々な長さの領域を1ステップRT-PCRで増幅した。

反応条件：45℃		30 min.
94℃		2 min.
↓
98℃		10 sec.		30 cycles
60 or 55℃		15 sec.
68℃		1 min./kb

【結果】

0.5～6 kbで、増幅が確認できた。

鋳型量（50 μl　PCR 反応系）
1	：	TFR	0.5 kb
2	：	Dystrophin	1 kb*
3	：	Dystrophin	2 kb*
4	：	CCND2	2.8 kb
5	：	TFR	4.4 kb
6	：	Dystrophin	6 kb*
M1	：	pHY Marker
M2	：	λ-Hind III digest
*	：	ヒト心臓由来のtotal RNAを鋳型として使用。他のターゲットはHL60由来のtotal RNAを使用

  PrimeScript™ II High Fidelity RT-PCR Kit