Western BLoT Stripping Buffer

Western BLoT Chemiluminescence HRP Substrate（製品コード T7101A）を用いてウェスタンブロット検出したPVDFメンブレンを使用して、本製品による抗体のストリッピングとリプローブを繰り返し行った。コントロールとして本製品の代わりにTBS-Tを用いて反応を行った。

1．β-actinの検出（1回目の抗原・抗体反応）	1 HeLa Cell Lysate 10.000 μg 2 HeLa Cell Lysate 5.000 μg 3 HeLa Cell Lysate 2.500 μg 4 HeLa Cell Lysate 1.250 μg 5 HeLa Cell Lysate 0.625 μg メンブレン: PVDF membrane ブロッキング剤: Skimmed milk/TBS-T、室温、60分 洗浄バッファー: TBS-T 一次抗体: anti-β- actin (mouse IgG) 二次抗体: anti-mouse IgG-HRP
ストリッピング（条件 : 室温、30分、0.25 ml/cm2メンブレン）
2．GAPDHの検出（2回目の抗原・抗体反応）
	洗浄バッファー: TBS-T 一次抗体: anti-GAPDH (mouse IgG) 二次抗体: anti-mouse IgG-HRP
ストリッピング（条件 : 室温、30分、0.25 ml/cm2メンブレン）
3．α-Tubulinの検出（3回目の抗原・抗体反応）	洗浄バッファー: TBS-T 一次抗体: anti-GAPDH (mouse IgG) 二次抗体: anti-mouse IgG-HRP
ストリッピング（条件 : 室温、30分、0.25 ml/cm2メンブレン）
4．残存抗体の検出	洗浄バッファー: TBS-T 二次抗体: anti-mouse IgG-HRP