Day0 | RHB-A培地で長期培養したHuman Neural Cortex Cell Lineを神経分化培地-1に懸濁し、poly-L-ornithine(Sigma-Aldrich社)およびLamininでコートしたプレートに2.5×104 cells/cm2となるように播種した。。 | |
Day1~6 | 神経分化培地-1で培養を継続し、2日に1回培地交換を行った。 | |
Day7~13 | 神経分化培地-2で培養を継続し、2日に1回培地交換を行った。 | |
Day14~28 | 神経分化培地-3で培養を続し、2日に1回培地交換をった。 |
添加剤 | 0.5% NDiff N2-AF(製品コード Y40110) 1.0% B-27 Supplement (50X), serum free(Thermo Fisher Scientific, cat. 17504044) 10 ng/mL Animal-Free Recombinant Human FGF-basic(Peprotech, cat. AF-100-18B) |
Basal培地 | 1:1 v/v RHB-Basal(製品コード Y40000)/ Neurobasal Medium, minus phenol red(Thermo Fisher Scientific, cat. 12348017) |
添加剤 | 0.25% NDiff N2-AF(製品コード Y40110) 1.0% B-27 Serum-Free Supplement 10 ng/ml Human FGF-basic 0.5% GlutaMAX Supplement(Thermo Fisher Scientific, cat. 35050061) |
添加剤 | 2.0% B-27 Serum-Free Supplement 20 ng/ml Recombinant Human/Murine/Rat BDNF(Peprotech, cat. 450-02) 1.0% GlutaMAX I(100×) |
1.Day0 | RHB-A培地で長期培養したHuman Neural Cortex Cell Lineをアストロサイト分化培地に懸濁し、poly-L-ornithine(Sigma-Aldrich社)およびLamininでコートしたプレートに2.5×104 cells/cm2となるように播種した。 | |
2.Day1~22 | アストロサイト分化培地で培養を継続し、2日に1回培地交換を行った。 |