CRISPR/Cas9システムを用いたノックアウト動物作製

ゲノム編集による動物作製

特長

  • CRISPR/Cas9システムを利用したノックアウト/ノックインしたマウス・ラットを作製
  • Tg動物作製の実績豊富な日本エスエルシー社(業務提携先)と連携した動物作製作業を実施
  • sgRNA、ノックインオリゴ(ssODN)の設計、作製から承ります

概要

RGEN(RNA guided endonuclease)はバクテリアの獲得免疫システムであるCRISPR/Cas9システム由来のRNA誘導型人工ヌクレアーゼで、従来型の人工ヌクレアーゼとは異なり、ガイドRNA(gRNA:guide RNA)とCas9エンドヌクレアーゼ(タンパク質)の二つの異なる分子が、標的DNA配列の認識とDNA二本鎖切断の働きをそれぞれ別々に担います。こうした特徴から、従来型人工ヌクレアーゼに対しRGENの設計が比較的容易である一方、本法は、従来技術と同等のゲノム編集効果が得られること、ならびに、複数箇所の同時ゲノム編集が容易に行えることなどから、新たなゲノム編集法として注目を集めています。

本サービスは、タカラバイオを窓口として、業務提携先のToolGen社によるCRISPR/Cas9システムの作製、日本エスエルシー社(業務提携先)およびタカラバイオによるノックアウト/ノックインマウスおよびラットの作製受託サービスを提供いたします。従来のトランスジェニック動物作製法と比較して、高効率かつ短期間でゲノム編集動物の作製が可能です。また高効率なCas9 recombinaseを用いたエレクトロポレーション法でもゲノム編集動物の作製が可能です。

■チラシをご覧ください。
ゲノム編集受託サービス

サービス内容

  • Active RGEN(aRGEN)設計・作製サービス
    GenBank Accession番号、生物種などのターゲット遺伝子情報からsgRNA(single-guide RNA)配列を設計します。設計したsgRNA配列を合成します。in vitroでの活性確認を行った高品質のsgRNAを使用します。

  • CRISPR/Cas9システムを利用したノックアウトマウスおよびノックアウトラットの作製(マイクロインジェクション)
    C57BL/6NCrSlcマウスあるいはSlc:SDラットなどの受精卵にsgRNAおよびCas9 mRNAをマイクロインジェクション法で導入します。インジェクション後、状態の良好な胚を仮親マウス(あるいはラット)の卵管に移植します。妊娠した仮親より産子を獲得し、抽出を行ったマウスゲノムから、編集領域のダイレクトシーケンスを行い、ファウンダー候補結果をご報告いたします。ご希望のマウス(あるいはラット)を納品又は次世代(F1)作製へ移行します。

    CRISPR/Cas9システムを利用したノックアウトマウスおよびノックアウトラットの作製(マイクロインジェクション)

  • CRISPR/Cas9システムを利用したノックアウトマウスおよびノックアウトラットの作製(エレクトロポレーション)
    C57BL/6NCrSlcマウスあるいはSlc:SDラットなどの受精卵にsgRNAおよびCas9 recombinaseをエレクトロポレーション法で導入します。エレクトロポレーション後、状態の良好な胚を仮親マウス(あるいはラット)の卵管に移植します。妊娠した仮親より産子を獲得し、得られたすべてのマウス(あるいはラット)を納品します。

  • CRISPR/Cas9システムを利用したノックインマウスおよびノックインラットの作製(エレクトロポレーション)
    C57BL/6NCrSlcマウスあるいはSlc:SDラットなどの受精卵にsgRNA、Cas9 recombinaseおよびssODNをエレクトロポレーション法で導入します。エレクトロポレーション後、状態の良好な胚を仮親マウス(あるいはラット)の卵管に移植します。妊娠した仮親より産子を獲得し、得られたすべてのマウス(あるいはラット)を納品します。
【オプションサービス】
  • ダイレクトシーケンス解析
  • ウェスタンブロット解析
  • TAクローニングによるシーケンス解析
  • オフターゲット領域予測
  • エクソームシーケンス解析による変異確認

価格・納期

サービス項目 参考価格 参考納期
ノックアウト動物(F0)の作製
(マイクロインジェクション)
¥1,850,000~ 1件あたり 約4.5ヵ月~
ノックアウト動物(F0)の作製
(エレクトロポレーション)
¥1,600,000~ 1件あたり 約4.5ヵ月~
ノックイン動物(F0)の作製
(エレクトロポレーション)
¥1,880,000~ 1件あたり 約4.5ヵ月~
次世代(F1)以降の動物作製 別途ご相談
(TAクローニングによるシーケンス解析) ¥480,000~ 5クローンあたり 4週間
ダイレクトシーケンス(DNA精製・20匹程度まで) ¥600,000    1件あたり 4週間
(ダイレクトシーケンスのPCR条件検討) ¥112,000    1領域あたり 1~2週間
 日本エスエルシー社での作業となります。
※ 本作業は、ご要望の作業仕様により価格が変動いたします。

納品物

  • 作業報告書
  • 編集動物

ご注文方法

以下のフォーマットにご記入のうえ、依頼書記載のFAX番号へご送付ください。

受入サンプル

・遺伝子、対象動物などの情報

ご留意事項

  • 本サービスはタカラバイオ提携のToolGen社および日本エスエルシー社で実施し、タカラバイオが販売するサービスです。納品物は研究用途においてのみご使用いただけます。
  • お客様よりご提供いただいたサンプル・情報および納品物の複製物は、別途期限を定めている場合を除き、業務終了後3ヵ月を経過すると順次廃棄いたします。ご了承ください。

ライセンス情報

K102 Patent application
This product (“Product”) and its use, is the subject of U.S. Patents 8,697,359 and 8,771,945 and pending U.S. Patent applications. The purchase of the Product conveys to the buyer the non-transferable right to use Product(s) purchased from Takara Bio USA, Inc. or its Affiliates, and any progeny, modification or derivative of a Product, or any cell or animal made or modified through use of a Product, or any progeny, modification or derivative of such cell or animal (“Related Material”), solely for research conducted by the buyer in accordance with all of the following requirements. No right is given to use this Product or Related Material for any other purpose, including, but not limited to, use in drugs, in vitro diagnostic purposes, therapeutics, or in humans. The buyer shall not sell or otherwise transfer Products (including without limitation any material that contains a Licensed Product in whole or part) or any Related Material to any other person or entity, or use Products or any Related Material to perform services for the benefit of any other person or entity, (ii) the buyer shall use only the purchased amount of the Products and components of the Products, and shall use any Related Material, only for its internal research and not for (a) the practice, performance or provision of any method, process or service, or (b) the manufacture, sale, use, distribution, disposition or importing of any product, in each case (a) or (b) for consideration, or on any other commercial basis (“Commercial Purpose”), (iii) the buyer shall use Licensed Products and any Related Material in compliance with all applicable laws and regulations, including without limitation applicable human health and animal welfare laws and regulations, and (iv) the buyer shall indemnify, defend and hold harmless MIT, Harvard and The Broad and their current and former trustees, directors, officers, faculty, affiliated investigators, students, employees, and agents and their respective successors, heirs and assigns (“Indemnitees”), against any liability, damage, loss, or expense (including without limitation reasonable attorneys’ fees and expenses) incurred by or imposed upon any of the Indemnitees in connection with any claims, suits, investigations, actions, demands or judgments arising out of or related to the exercise of any rights granted to the buyer, or any breach of the rights granted hereunder by the buyer.

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注意事項
  • 本受託サービスは、すべて研究目的として作業を行います。納品物を試験研究目的以外へご使用される場合、弊社では納品物に起因する損失・損害等については一切の責任を負いかねます。納品物によっては、その構成物(例えば、ベクター、蛍光色素など)の使用に制限がある場合がありますのでご注意ください。
  • 納品物に起因して、直接的もしくは間接的に発生したお客様の損害については、明らかに弊社の責に帰すべき事由による場合を除いて、弊社は一切その責任を負いません。

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