メーカー 略称 |
製品コード | TaKaRa Code |
製品名 | 容量 | 価格(税別) キャンペーン価格 |
特記事項 | 説明書 データシート ベクター情報 |
参考 資料 |
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CLN | 635723 | Z5723N | Capturem™ Exosome Isolation Kit (Cell Culture) | 6回 |
¥52,000 ¥41,600 |
2019/11/25~ 2020/03/31 |
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※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。
エキソソームは細胞から分泌される膜小胞で、癌を含む様々な疾患のバイオマーカーとして注目されており、基礎研究分野においても製薬研究分野においても重要な研究対象となっている。
Capturem Exosome Isolation Kit (Cell Culture)は、細胞培養上清からエキソソームを迅速、高収率、高純度に精製するキットである。抗体を用いず、次世代メンブレン技術であるCapturemテクノロジーと非公開のエキソソーム結合物質を組み合わせることにより、培養上清から30分以内にエキソソームを精製することができる。キットには細胞残渣を除去するための前処理カラム、エキソソーム吸着カラムおよび、エキソソームのカラム精製に適したWash buffer、Elution bufferが含まれている。超遠心機は必要なく、一般的な遠心機で使用できる。Maxiprepサイズのカラムを用いているため、25 mlの培養上清を一度に処理でき、最大2×1011個のエキソソームを得ることができる。なお、本製品は血液サンプルからのエキソソーム精製には使用できない。
Capturem Exosome Isolation Kit (Cell Culture)用いて精製したエキソソームと超遠心法によって精製したエキソソーム、および精製前の細胞培養上清をPKH26(赤)でラベルし、HEK293T細胞に添加した。PKH26でラベルされたエキソソームが細胞に取り込まれると赤色の蛍光を発する。また、対比染色としてNucBlue(青)による核染色を行った。 Capturem Exosome Isolation Kit (Cell Culture)で精製したエキソソームは、超遠心法より少ない使用量で細胞取り込みアッセイを実施することができ、インタクトなエキソソームが高効率に回収できていることが示された。
細胞ライセート、細胞培養上清、Capturem Exosome Isolation Kit (Cell Culture)溶出液、超遠心回収液についてウェスタンブロッティングでCD81、Alixを検出した。
HEK293細胞の培養上清10 ml(ろ過済み)からCapturem Exosome Isolation Kit (Cell Culture)、沈殿法の試薬(T社)、超遠心法によってエキソソームを濃縮し、ナノ粒子解析(nanoparticle tracking analysis:NTA)によって収量(パネルA)と平均サイズ(パネルB)を調べた。濃縮後の収量(Particles/ml)はInput量(10 ml)に換算した数値を示した。Capturem Exosome Isolation Kit (Cell Culture)では約70%の収量が得られた。
パネル A:HEK293T細胞から精製したエキソソームの粒子径-粒子濃度分布プロット(ピーク95 nm)およびD90(211 nm)
パネル B:粒子径 vs 散乱強度(各粒子径の相対出現頻度) vs 粒子濃度(particles/ml)の3DプロットCapturem Maxiprep Exosome Isolation Columns (Cell Culture) | 6個 |
Exosome Isolation Pre-Clearing Columns | 6個 |
Exosome Isolation Wash Buffer | 70 ml |
Exosome Isolation Elution Buffer | 4 ml |