レトロウイルス調製細胞 G3T-hi細胞

高効率感染レトロウイルス調製細胞
製品コード メーカー
略称
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報
参考資料 カート
Takara Code
6163

TKR

タカラバイオ(株)
レトロウイルス調製細胞 G3T-hi細胞
レトロウイルスベクターによる遺伝子導入 ライセンス
2×106 cells/vial ¥83,000
¥66,400
2023/11/27~
2024/03/29

在庫なくなり次第終売
説明書・データシート・ベクター情報
6163
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製品説明

G3T-hi細胞は、ヒト腎臓由来の細胞株293T(G418耐性)にハイグロマイシン耐性遺伝子を用いてヒトN-アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ III(N-acetylglucosaminyltransferase III :GnT-III)を導入したGnT-III高発現細胞株である。
本細胞は、Retrovirus Packaging Kit Eco(製品コード 6160)またはRetrovirus Packaging Kit Ampho(製品コード 6161)を用いて、gag-polenv遺伝子の発現ベクタープラスミドと目的遺伝子を組み込んだ組換えレトロウイルスベクタープラスミドを共導入することにより、迅速かつ一過性に高力価の組換えウイルスを産生できるようデザインされている。本細胞は293T由来であるため、SV40のT抗原遺伝子が導入されており、この働きによってレトロウイルスのRNAが増幅され、高力価ウイルス液が得られる。通常、Retrovirus Packaging Kitを用いた一過性発現では105~107 cfu/mlのウイルス液が得られる。
G3T-hi細胞は、細胞膜糖鎖がGnT-IIIにより修飾されることを特徴とする。発芽するレトロウイルスは宿主細胞膜を纏うため、本細胞より得られた組換えレトロウイルスの膜タンパク質糖鎖は、GnT-IIIにより修飾を受けていると推測される。この糖鎖修飾により、本細胞を用いて調製したレトロウイルスは、RetroNectin*(組換えヒトフィブロネクチンフラグメント)への親和性が高くなっている。したがって、培養器のコート剤としてRetroNectinを用いることにより標的細胞への遺伝子導入効率が大きく向上する。RetroNectinは特に血球系細胞を標的とした遺伝子導入に有効である。

* RetroNectin(製品コード T100A/B):フィブロネクチンの細胞接着ドメインとヘパリン結合ドメインを有する組換えヒトフィブロネクチンフラグメント
   【組換えレトロウイルスの作製の概略】

内容

2×106 cells/vial

保存

液体窒素中凍結保存
(ドライアイス梱包のため、製品到着後ただちに液体窒素中で保存する。液体窒素保存ができない場合は、ただちに細胞を融解し培養を行うこと。)

その他必要な器具・装置および試薬(主なもの)

1. 器具・装置
  • 安全キャビネット
  • 細胞観察用顕微鏡
  • CO2インキュベーター
  • -80℃フリーザー
  • 滅菌済ピペット
  • フィルター付滅菌済チップ
  • 5 mlポリスチレン丸底チューブ
  • ゼラチンまたはコラーゲンコートシャーレ
  • 0.45 μm滅菌済フィルター(低吸着タイプ)
  • 2 ml滅菌済チューブ(ウイルス保存用)
  • 電動ピペッター
  • 細胞凍結容器(~1℃/分で温度低下が可能なもの)(Nalgene Code 5100-0001等)
2. 試薬類
  • 組換えレトロウイルスベクタープラスミド(高純度に精製されたもの)
  • Retrovirus Packaging Kit Eco(製品コード 6160)
     またはRetrovirus Packaging Kit Ampho(製品コード 6161)
  • Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM) 4.5 g/L Glucose with L-Glutamine (584 mg/L)(Lonza Code. 12-604F/12-604Q)
  • Fetal Bovine Serum(FBS)
  • Panicillin-Streptomycin Mixture(Lonza Code. 17-602E)
  • Trypsin/EDTA (1X)(Lonza Code. 17-161E)
  • 滅菌済みPBS(-)(1×)
  • 細胞凍結保存液(CELLBANKER 1;製品コード CB011/CB013)
  • RetroNectin (Recombinant Human Fibronectin Fragment)(製品コード T100A/B)
  • ポリブレン(臭化ヘキサジメトリン;Sigma Code. H9268)
  • 滅菌精製水

本製品の使用について

本製品をご利用の際は、以下の点にご注意ください。
  • 本製品の使用はすべて研究用に限定されています。臨床目的での使用および生体外診断に使用することはできません。(本製品により得られた生物材料を第三者に譲渡することもできません。)また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
  • 本製品を研究目的以外に使用される場合は、事前に弊社にお問い合わせください。商業目的に使用される場合は、個別にライセンス契約の締結が必要です。
  • 本レトロウイルスベクターの系によって生産されるウイルス上清液は挿入断片によっては危険なウイルスを含む恐れがあるため、組換えレトロウイルスの生産と取扱いには、適切な処置をとる必要があります。ご利用の際は、文部科学省の定める省令「研究開発等に係る遺伝子組換え生物等の第二種使用等に当たって執るべき拡散防止措置等を定める省令」平成16年文部科学省・環境省令第1号および組織内の安全委員会の指示に従って行ってください。
  • 本製品の使用によって生じたいかなる事故、損害についても、弊社では責任を負いかねますので、ご了承の上ご使用ください。
注意事項
  • 本ページの製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
  • タカラバイオの承認を得ずに製品の再販・譲渡、再販・譲渡のための改変、商用製品の製造に使用することは禁止されています。
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