定量PCRでゲノムコピー数を迅速に測定

Adeno-X™ qPCRタイター測定キット

  • 組換えアデノウイルス力価(ゲノムDNAコピー数)を定量PCRで測定
  • 迅速、簡単かつ正確
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
CLN 632252 Z2252N Adeno-X™ qPCR Titration Kit
  • ライセンス
200回 ¥81,400
説明書・データシート・ベクター情報
Adeno-X qPCR Titration Kitは、SYBR Green Iを用いたqPCR(定量PCR、リアルタイムPCR)法により、あらゆるアデノウイルス5型の力価を迅速・正確に測定する(図1)。まず、コピー数既知のコントロールDNAの希釈系列サンプルで測定を行い、得られたCt値から検量線を作成する。この検量線を用いて、濃度未知サンプルのCt値からDNAコピー数を求めることができる。ダイナミックレンジは少なくとも6桁の範囲にわたり、未精製のクルードサンプルでも精製サンプルでも同等の結果が得られる。
アデノウイルスのゲノムDNAコピー数と他の力価測定法で求めたIFUとの相関関係を一度確認しておけば、細胞に感染する際のMOIを迅速(約4時間)かつ正確に求めることができる。
本キットにはqPCR 200反応分のコンポーネントが含まれている。


図1. リアルタイムPCR法を利用したAdeno-X qPCR Titration Kitの操作の流れ

内容

Adeno-X qPCR Titration Kit
(製品コード 632252)
Adeno-X qPCR Titration Components(別売なし)
・Adeno-X DNA Control Template
・Adeno-X Forward Titer Primer
・Adeno-X Reverse Titer Primer
・DNase I
・EASY Dilution Buffer
SYBR Advantage qPCR Premix(製品コード 639676)
・2× SYBR Advantage qPCR Premix
・50× ROX Reference Dye LSR
・50× ROX Reference Dye LMP
NucleoSpin Virus Kit
・Lysis Buffer RAV1
・Wash Buffer RAW
・Wash Buffer RAV3
・Nase-free H2O
・Elution Buffer RE
・Carrier RNA
・Proteinase K
・Proteinase Buffer PB
・NucleoSpin Virus Columns
・Collection Tubes

ウェル間の蛍光シグナルの補正を行う装置で解析する場合に使用します。
  • ROX Reference Dye LSRを添加する機種
    光源がレーザーの機種  :Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System (Thermo Fisher Scientific社) など
    (注意)StepOne/ StepOnePlus Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)はLED光源ですが、ROX Reference Dye LSRをご使用ください。
  • ROX Reference Dye LMPを添加する機種
    光源がLamp またはLEDの機種 :Applied Biosystems 7500/7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社) など

保存

Adeno-X qPCR Titration Components:-20℃
SYBR Advantage qPCR Premix:-70℃遮光保存(融解後は4℃で遮光保存)
NucleoSpin Virus Kit:室温

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注意事項
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