汎用EMA試薬:グラム陽性菌用(EMA-PCR法)

Viable Bacteria Selection Kit for PCR (Gram Positive)

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR 7705 7705 Viable Bacteria Selection Kit for PCR (Gram Positive)
100回 ¥55,000
説明書・データシート・ベクター情報
TKR EM200 EM200 LED Crosslinker 12
一式 ¥107,800
TKR CY290 CY290 Control Test Kit (Viable Bacteria Selection)
  • ライセンス
50回 ¥28,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

Viable Bacteria Selection Kit for PCR (Gram Positive)は、Bacillus属、Listeria属、Staphylococcus属、Bifidobacterium属などのグラム陽性菌を対象としてEMA-PCRを行うための前処理用キットである。本製品を用いて対象とする細菌の前処理(EMA処理)条件を最適化し、効率よく死菌由来DNAの修飾を行うことで、リアルタイムPCR(qPCR)やエンドポイントPCRにより、生菌由来DNAのみを選択的に検出する系を構築することができる。

【注記】
別売のControl Test Kit (Viable Bacteria Selection)(製品コード CY290)と併せて使用することで、Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズを用いたEMA処理操作が、検体由来成分による反応阻害などを受けることなく正しく行われたかどうかを確認することができる。
Viable Bacteria Selection Kit for PCRシリーズの試薬コンポーネントには反応確認用のプラスミドDNAがあらかじめ混合されており、検体に対するEMA処理が正しく行われると、このプラスミドDNAも同時に修飾され、PCR増幅できない状態になる。従って、EMA処理を行った検体に対して、このプラスミドDNA上の領域をターゲットとするPCR増幅を行うことで、EMA処理操作の成否を確認することが可能である。

内容

(100検体分)
1.Solution A-gp500 μl×2
2.Solution B-gp200 μl×8
3.Dilution Buffer1 ml×8
光による化学反応により物質性状が変化し、核酸修飾能力が減衰しますので、遮光に留意してください。
Solution A-gp:核酸修飾反応の促進試薬です。EMA処理操作の成否を確認するためのプラスミドDNAを含みます。
Solution B-gp:選択的膜透過性色素(EMA)を含む溶液です。

保存

-20℃

キット以外に必要な機器、試薬(主なもの)

1.5 mlマイクロチューブ
卓上遠心機
微量高速冷却遠心機
マイクロピペット
マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
ボルテックスミキサー
【前処理操作(EMAによる死菌由来DNAの修飾)】
光照射装置 LED Crosslinker 12(製品コード EM200)*1、またはLED Crosslinker*1、2
ヒートブロック(95℃で使用可能なもの)
1.5 mlマイクロチューブ*3
【DNA抽出】
NucleoSpin Tissue XS(製品コード 740901.10/.50/.250)*4
特級エタノール(>99%)
ヒートブロック(56℃および70℃で使用可能なもの)
20 mg/ml lysozyme in 20 mM Tris-HCl, 2 mM EDTA, 1% Triton X-100 (pH8.0)
【対象となるグラム陽性菌の遺伝子検出】
リアルタイムPCR検出またはエンドポイントPCR検出に必要な試薬類、プライマー、装置などをそれぞれ用意してください。

*1ハロゲンランプ[岩崎電気株式会社、写真証明用アイランプ スポット(集光形)、PRS500W]、LEDランプ[東芝E-CORE LED電球、LDA7N-H]で代用できる。
*2 本製品の販売は終了しました。
*3 透明チューブの使用を推奨。弊社では下記のチューブで実績がある。
[1.5 mlチューブ(スクリューキャップ)]
1.5 mlループ付凍結保存チューブ(SARSTEDT:Code. 72.692.100)
[1.5 mlチューブ]
DNA LoBindチューブ, 1.5 ml PCR clean(Eppendorf:Code 0030108051)
*4 使用検体に着色や濁りがあるなど夾雑物の混入が疑われる場合はNucleoSpin Soil(製品コード 740780.10/.50/.250)の使用をお勧めする。

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