鳥インフルエンザウイルス検出用Primer

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略称
製品コード TaKaRa
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製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
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参考
資料
TKR 6640 6640 qPCR Subtyping Primer Set for HA of Avian Influenza
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1 Set ¥58,000
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TKR 6641 6641 qPCR Subtyping Primer Set for NA of Avian Influenza
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1 Set ¥33,000
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製品説明

本製品は鳥インフルエンザウイルスのHA(Hemagglutinin)、またはNA(Neuraminidase)遺伝子の塩基配列から設計されたプライマーのセットである。逆転写反応試薬としてPrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(製品コード RR037A/B)、qPCR反応試薬にはTB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)(製品コード RR420S/A/B)*1を組み合わせてリアルタイムRT-PCRを行うことにより、鳥インフルエンザウイルスのHA遺伝子(製品コード 6640)、またはNA遺伝子(製品コード 6641)*2の亜型判定が可能*3である。

*1 タカラバイオでは、インターカレーター法のリアルタイムPCR(qPCR)試薬の製品名を2017年10月下旬より順次、「TB Greenシリーズ」に名称変更いたします。製品コードや試薬の性能に変更はありません。これまで通りご使用ください。
*2 本製品は独立行政法人 農業・食品産業技術総合研究機構が出願した特許を利用し、タカラバイオが製品化しました。
*3 プライマー配列はHA遺伝子(製品コード 6640)、またはNA遺伝子(製品コード 6641)の亜型を判定できるように最適化されていますが、遺伝子によっては判定が困難な可能性があります。

対象となる亜型

(製品コード 6640)
H1~H16

(製品コード 6641)
N1~N9

検出対象領域

(製品コード 6640)
プライマーNo.1~22
23
 HA(Hemagglutinin) gene
 NP(Nucleoprotein) gene

(製品コード 6641)
プライマーNo.1~11
12
 NA(Neuraminidase) gene
 NP(Nucleoprotein) gene

内容

(各プライマー 25反応分, 20 μl反応)
qPCR Subtyping Primer Set for HA of Avian Influenza(製品コード 6640)
HA Subtype Lingage Primer 22本(1~22)
NP Eu/Am Lingage Primer 1本(23)
(Forward & Reverse Primer Mix, 5×conc. 各100 μl)

qPCR Subtyping Primer Set for NA of Avian Influenza(製品コード 6641)
HA Subtype Lingage Primer 11本(1~11)
NP Eu/Am Lingage Primer 1本(12)
(Forward & Reverse Primer Mix, 5×conc. 各100 μl)

  No. (製品コード 6640)  No. (製品コード 6641)
  1. H1 Subtype Eu Lineage Primer
  2. H1 Subtype Am Lineage Primer
  3. H2 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  4. H3 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  5. H4 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  6. H5 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  7. H6 Subtype Eu Lineage Primer
  8. H6 Subtype Am Lineage Primer
  9. H7 Subtype Eu Lineage Primer
  10. H7 Subtype Am Lineage Primer
  11. H8 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  12. H9 Subtype Eu Lineage Primer
  13. H9 Subtype Am Lineage Primer
  14. H10 Subtype Eu Lineage Primer
  15. H10 Subtype Am Lineage Primer
  16. H11 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  17. H12 Subtype Eu Lineage Primer
  18. H12 Subtype Am Lineage Primer
  19. H13 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  20. H14 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  21. H15 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  22. H16 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  23. NP Eu/Am Lineage Primer
  1. N1 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  2. N2 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  3. N3 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  4. N4 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  5. N5 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  6. N6 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  7. N7 Subtype Eu/Am Lineage Primer
  8. N8 Subtype Eu Lineage Primer
  9. N8 Subtype Am Lineage Primer
  10. N9 Subtype Eu Lineage Primer
  11. N9 Subtype Am Lineage Primer
  12. NP Eu/Am Lineage Primer
Eu:ユーラシア系統のインフルエンザ遺伝子検出用
Am:北米系統のインフルエンザ遺伝子検出用
Eu/Am:ユーラシア系統および北米系統のインフルエンザ遺伝子検出用

形状

TE Buffer:10 mM Tris-HCl (PH8.0)、0.1 mM EDTAに溶解

反応例

=逆転写反応=
PrimeScript RT reagent Kit (Perfect Real Time)(製品コード RR037A/B)を使用

○反応液組成
5×PrimeScript Buffer (for Real Time)2 μl
PrimeScript RT Enzyme Mix I0.5 μl
Random 6 mers(100 μM)0.5 μl
total RNA
RNase Free dH2O
Total10 μl
10 μlの反応液で逆転写できるのは、およそ500 ngまでのtotal RNAである。
逆転写反応は、必要に応じてスケールアップすることも可能
○逆転写反応条件
37℃15 min.
85℃5 sec.
4℃

=qPCR反応=
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)(製品コード RR420S/A/B)を使用

○反応液組成
各プライマー溶液ごとに別々に下記反応液を調製ください。

TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)(2×conc.)10 μl
Primer4 μl
RT反応液 or 陰性コントロール(滅菌精製水)1 μl
滅菌精製水5 μl
Total20 μl

○qPCR条件
95℃30 sec.
95℃30 sec.
30 cycles
50℃20 sec.
72℃32 sec.
Dissociation(融解曲線分析)
Applied BiosystemsのリアルタイムPCR装置の場合、反応液にROX Reference Dye/ROX Reference Dye IIの添加が必要で す。詳細は、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)の取扱説明書をご参照ください。

  遺伝子検出・検査 関連試薬の選択フローをご利用ください

分野別の試薬選択フロー
手法別の試薬選択フロー

「検査(PCR/ELISA)」関連のお役立ち情報専用ページもご参照ください。

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