リアルタイムPCR法によるノロウイルス検査キット(検便検査)

TaKaRaノロウイルスGI/GII検出キットVer.2

  • 1ステップリアルタイムRT-PCRは約47分で完了
  • 「大量調理施設衛生管理マニュアル」に則った検査が可能
  • 通知法と同じ塩基配列のプライマー、プローブを採用
  • 1チューブでGI/GII遺伝子とインターナルコントロールを検出
  • UNGの働きによりPCR増幅産物のキャリーオーバーによる偽陽性を防止
  • カラムによるRNA精製や熱処理は不要、キット添付のLysis bufferで検便検体から簡易抽出
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR RR297A RR297A TaKaRaノロウイルスGI/GII検出キットVer.2
100回 ¥128,000
説明書・データシート・ベクター情報

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製品説明

ノロウイルスは急性胃腸炎の主要な原因ウイルスであり、組織培養法などを用いた分離・検出が困難なため、RT-PCR法やリアルタイムRT-PCR法などによって、ウイルスの検査診断が行われている。本製品は、リアルタイムRT-PCRにより検便検体からノロウイルス(GI およびGII)遺伝子を検出するためのキットである。簡単な前処理を行うだけで、検便検体から1ステップのリアルタイムRT-PCRが行える。プローブによるマルチプレックス検出により、1反応でGI遺伝子、GII遺伝子、インターナルコントロールを同時に検出し、GIとGIIを明確に区別できる。融解曲線分析は不要である。GIおよびGII遺伝子の検出には、厚生労働省 医薬食品局 食品安全部 監視安全課より通知された「ノロウイルスの検出法について」(食安監発第1105001号、最終改正:平成25年10月22日付け食安監発1022第1号)に収載されたものと同じ配列のプライマー、プローブを使用している。

【特長】
  • 「リアルタイムPCR法」で「大量調理施設衛生管理マニュアル*1に則った検査が可能。
    厚生労働省通知法*2収載されたプライマー・プローブ配列を採用している。


    大量調理衛生管理マニュアルに記載された
    「概ね便1 g当たり105オーダーのノロウイルスを検出できる検査法」に対応している。

    *1 「大量調理施設衛生管理マニュアル」(平成9年3月24日付け衛食第85号別添 最終改正:平成29年6月16日付け生食発0616第1号)

    *2 「ノロウイルスの検出法について」 厚生労働省医薬食品局食品安全部監視安全課
    (平成15年11月5日付け食安監発第1105001号別添 最終改正:平成25年10月22日付け食安監発1022第1号)

  • 1ステップリアルタイムRT-PCRを採用し、検体添加後の反応時間が約47分で完了

    Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)における反応時間。Thermal Cycler Dice Real Time System III (cy5) with PC(製品コード TP990)の場合、反応時間は53分。
    各社機種に対応しております。詳しくはお問い合わせください。

  • PCR増幅産物のキャリーオーバーによる偽陽性を防止。
    PCRは非常に高感度な検出方法であるため、以前に行ったPCR増幅産物のキャリーオーバーによる偽陽性が生じる場合がある。本製品ではUNG(ウラシル-N-グリコシラーゼ)の働きにより、キャリーオーバーしたPCR産物を分解するため、偽陽性を防止することができる。
  • 鋳型の調製は簡単な前処理だけで完了します。カラム精製、熱処理は不要。
    Lysis Buffer (NV) 5に検便検体を添加するだけで、鋳型の簡易調製が完了

    ターゲット遺伝子リアルタイムPCR装置の蛍光検出フィルター
    GI遺伝子Cy5
    GII遺伝子ROX
    インターナルコントロールFAM

    ※ GII.17 norovirus variant(GII.P17-GII.17)の検出について
    GII.17 norovirus variant(GII.P17-GII.17)の検出可否について

【判定ツールについて】
本製品での取得データから、陽性または陰性を判定する解析ツールをご用意しております。
現在、Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ、CFX96 Touch Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad社)などに対応しております。
詳しくは下記までお問い合わせください。
<お電話でのお問い合わせ先>
Tell: 077-565-6972
タカラバイオ ノロウイルス検出キット製品担当まで

内容

1Lysis Buffer(NV)5500 μl
○ 2PCR Buffer(NV)6*1700 μl×2
3Enzyme Mix(NV)6*2200 μl
4NV Primer/Probe Mix6*3300 μl
5NV Positive Control DNA4*3 75 μl

*1 dNTP MixtureおよびMg2+、酵素等を含む。
*2 Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor、Taq polymerase、UNG等を含む。
*3 蛍光標識プローブを含んでいるため、遮光に留意すること

保存

-20℃

キット以外に必要な試薬、機器(主なもの)

【器具】
  • 200 μl、20 μl、10 μl各マクロピペット
  • マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
【機器】
  • 微量高速遠心機
  • リアルタイムPCR装置(Cy5、ROX、FAMを検出可能なもの)
    Thermal Cycler Dice Real Time System III(Cy5) with PC(製品コード TP990)
    Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900/TP960)
    Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700/TP760)

    注:TP900/TP960、TP700/TP760は、Cy5オプションフィルターの追加が必要です。
    Filter Unit(Cy5) for Thermal Cycler Dice Real Time System(製品コード TP803)
    Filter Unit(Cy5) for LED(製品コード TP703)

    CFX96 Touch Deep Well Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad社)
    LightCycler 96/LightCycler 480 System(Roche Diagnostics社)
    Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)

補足資料

Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual”を用意している。
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用する。
Thermal Cycler Dice Real Time System III (cy5) with PC(製品コード TP990)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700)
牡蠣やふき取り検体等には、食品環境検査用のTaKaRa qPCR Norovirus (GI/GII) Typing Kit(製品コード RR250A/B)をご利用ください。
ノロウイルス検便検査のための操作マニュアル -TaKaRaノロウイルスGI/GII検出キット(製品コード RR297A)専用-

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注意事項
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