製品説明
ウシ白血病ウイルス(bovine leukemia virus;BLV)は、血液や乳汁のBリンパ球のDNAにプロウイルスとして組み込まれるレトロウイルスである。日本においてこのウイルスに感染したウシの割合は、20%と言われており、感染してから発症までが5~10年以上と長く、また、治療法が確立されていないことから、このウイルスが引き起こす畜産農家への経済的損失は非常に深刻である。
本製品は、ウシ白血病ウイルスのtax遺伝子ターゲットとして、プロウイルスとして組み込まれたウシ白血病ウイルス(BLV)をリアルタイム PCR装置を用いて検出するために必要な、Probe、Primer、Positive controlからなる。リアルタイムPCRを行うためには、本製品の他にDNA polymeraseやTli RNaseH等の酵素が必要であり、これらの酵素と、これらの酵素に最適化されたバッファーが含まれたプレミックスタイプ試薬CycleavePCR Reaction Mix SP(製品コード CY510:終売)が使用できる。この製品では、PCR反応にHot Start PCR用酵素、TaKaRa Ex Taq HSを使用し、増幅産物の検出にはサイクリングプローブ法を採用している。
本製品は国立研究開発法人 農業・食品産業技術総合研究機構 動物衛生研究所との共同研究及び、国立大学法人 岩手大学 村上賢二教授のご協力のもとにタカラバイオが製品化しました。
内容
(25 μl反応、50回)
1. | Probe/Primer Mix for BLV(5×)*1 | 250 μl |
2. | Positive Control(2×105 copies/μl)*2 | 100 μl |
3. | EASY Dilution (for Real Time PCR) | 1 ml |
*1 |
蛍光標識プローブを含んでいますので遮光に留意してください。 |
*2 |
コンポーネント1に誤って混入すると、正しい検出反応を行うことができなくなります。コンポーネント2、3は付属のキットケースに移し、別に保存してください。 |
保存
-20℃
キット以外に必要な試薬、機器(主なもの)
- 【機器】
- リアルタイムPCR装置および専用チューブ
Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900/TP960など)*3
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700/TP760など)*3
食品環境検査用ソフトウェア(日本語表示)
または、Thermal Cycler Dice Real Time System Software
Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Thermo Fisher Scientific社)など
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0.2 mlリアルタイムPCR用チューブ
0.2 ml 8-strip tube, individual Flat Caps(製品コード NJ600)
*3 | チューブ1本ごとにフラットキャップが付いているキャップ付き0.2 ml 8連チューブをThermal Cycler Dice Real Time System専用として販売している。チューブ間のコンタミネーションリスクを軽減できる。
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- 【試薬】
- CycleavePCR Reaction Mix SP(製品コード CY510)
キットの内容
1. | 2×CycleavePCR Reaction Mix SP | 625 μl |
2. | RNase Free dH2O | 500 μl |
3. | ROX Reference Dye | 25 μl |
4. | ROX Reference Dye II | 25 μl |
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DNA調製キット
全血からDNA を抽出する場合は、NucleoSpin Blood QuickPure(製品コード 740569.10/.50/.250)などをお勧めします。
- 【その他】
- 1.5 mlチューブ
1,000 μl、200 μl、20 μl、10 μl各マイクロピペット
マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
卓上遠心機、微量高速遠心機(4℃設定が可能なもの)