Polyclonal Anti-Mouse Osteocalcin
総合カタログ2009 N-35
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マウス顎骨の免疫組織染色
本製品を用いたマウス顎骨の免疫組織染色実験を、大阪大学大学院歯学研究科 顎口腔病態制御学講座の豊澤悟先生に行っていただきました。その結果をご紹介します。
【方法】
●組織切片の調製
●免疫組織染色
材 料： 生後3週齢マウスの顎骨 操作手順： 1）4％パラホルムアルデヒド溶液による固定 2）10％EDTAによる脱灰 4℃、1週間 3）アルコールによる脱水 4）キシレン透徹 5）パラフィン包埋 6）薄切
一次抗体： 抗マウスOC（1-20）・ウサギポリクローナル抗体 使用濃度 0.7 μg/ml 組織切片： マウスのEDTA脱灰パラフィン包埋切片 検出方法： sABCシステム（DAKO社） 操作手順： 1）脱パラフィン 2）抗原賦活法：トリプシンで37℃、20分処理（トリプシン溶液の組成：トリプシン25 mg、0.01 M PBS ml）。 3）非特異的タンパク質のブロッキング 4）一次抗体 4℃、一晩 5）ビオチン標識二次抗体 室温30分 6）内因性ペルオキシダーゼのブロッキング 7）StreptABComplex 室温30分 8）DAB反応 9）対比染色（メチルグリーン） 10）脱水・透徹・封入 【結果】
マウス顎骨組織（A〜C）およびマウス上顎切歯組織（D〜F）の免疫染色の結果を下図に示す。
A： 顎骨の骨梁に沿って見られる骨芽細胞（ob）に強い陽性反応が認められる。 B： Aの骨芽細胞の強拡大 C： 骨基質（b）に免疫反応が認められる。 D： 上顎切歯根尖孔付近。前象牙芽細胞（pod）から分化した象牙芽細胞（od）に強い陽性反応が認められる。 E： Dの象牙芽細胞の強拡大。 F： 上顎切歯のDより切端側の象牙芽細胞に強い陽性反応が認められる。
マ
ウ
ス
顎
骨マ
ウ
ス
上
顎
切
歯写真内の略語 b：bone；ob：osteoblast；pod：preodontoblast；d：dentin；od：odontoblast；e：enamel；am：ameloblast；pu：pulp
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