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RetroNectin GMP gradeのフィルターろ過およびコーティング

RetroNectin^® GMP grade

使用方法
フィルターろ過

1. 必要な器具・装置および試薬（主なもの）
   
   • 滅菌済シリンジ、針
   • 0.22 μmフィルター
     （MERCK MILLIPORE MILLEX-GV, SLGV 033 RSなど）
2. プロトコール
   融解させた1.0 mg/mlのRetroNectin溶液を0.22 μmのフィルターに通す。

【注】	フィルターろ過は、1.0 mg/mlのRetroNectin溶液で行ってください。RetroNectinがフィルターに吸着する恐れがあるため、希釈後の溶液はフィルターろ過しないでください。また、タンパク質低吸着タイプ以外のフィルターを使用する場合にもフィルターに吸着する恐れがありますので注意が必要です。

希釈およびRetroNectinのコーティング

1. 必要な器具・装置および試薬（主なもの）
   
   • PBS(-)
   • 滅菌済ピペット、フィルター付き滅菌チップ
2. プロトコール
   RetroNectin濃度が4～20 μg/cm²となるようにプレート等の容器にコーティングを行う。
   
   1. 滅菌済のPBS（Phosphate Buffered Saline）またはACD-A（Acid Citrate Dextrose Formula A）溶液を用いて、適当な濃度（20～100 μg/ml）となるように無菌的にRetroNectin溶液を希釈する。
   2. 適当量のRetroNectin希釈液をコートしたい容器全体に広がるように加え、室温で0.5時間以上または4℃で一晩放置する。
   3. RetroNectin希釈液を除き、適当量の洗浄バッファー（PBS等）で洗浄する。
   4. 洗浄バッファーを除き、RetroNectinコート容器とする。

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