従来条件と高速条件の比較
| ● | 鋳型DNA： | 大腸菌O-157菌体熱抽出液 control template |
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| ● | 増幅ターゲット： | ベロ毒素遺伝子VT1由来の349 bp ベロ毒素遺伝子VT2由来の112 bp control template由来の1,070 bp |
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| ● | 反応volume： | 100 μl | ||||||||||||||||||||||
| ● | PCR条件： | どちらもTaKaRa Thermal Cycler MPを使用
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| ● | 電気泳動： | 3％ Agaroseに反応液10 μlを泳動 | ||||||||||||||||||||||
【結果】
写真に示すように、高速条件のPCRでも、鋳型DNAが少ない場合にややバンドの強度が落ちるものの、従来条件とほぼ同等の検出ができた。もちろんコロニーPCRでの検出も、まったく問題なく行うことができる。高速条件で反応させることにより、PCR反応から電気泳動による検出までの工程を2時間以内（従来条件では3時間以上）で終了できるようになるので、検体数が多く、迅速な判定を必要とする食品の病原微生物検査の大幅なスピードアップが可能となる。
写真 従来条件と高速条件の比較
| レーン | ||
| M | ： | 100 bp DNA Ladder（製品コード 3407A/B） |
| N | ： | Negative Control |
| 1 | ： | 1 cell相当/反応系 |
| 2 | ： | 10 cells相当/反応系 |
| 3 | ： | 102 cells相当/反応系 |
| 4 | ： | 103 cells相当/反応系 |
検体を段階希釈し、検出感度を調べた。一番上のバンド（1,070 bp）はpositive control template、下2本のバンドはベロ毒素遺伝子由来のバンドである。
