特長
- 高力価・高純度！動物投与に必要な1010 IFU/mlオーダー以上の高純度クローン化アデノウイルスベクター調製も可能
- 正確！クローン単離により正確なウイルスベクターを作製
- 高発現！強力なCAGプロモーターを搭載
- EF1αプロモーターも選択できます。
概要
東京大学医科学研究所の齋藤泉博士らにより開発された高効率なアデノウイルス作製法（完全長DNA導入法）を利用した組換えアデノウイルス作製キットAdenovirus Dual Expression Kit（製品コード 6170）、Adenovirus Dual Expression Kit (EF1α)（製品コード 6174）を用いて、目的遺伝子を搭載したアデノウイルスベクターを作製いたします。
アデノウイルスベクターを用いた遺伝子導入法は、以下の利点を持ち、多くの遺伝子導入実験に利用されています。
■チラシをご覧ください。
ウイルスベクター作製サービス
アデノウイルスベクターを用いた遺伝子導入法は、以下の利点を持ち、多くの遺伝子導入実験に利用されています。
- 一過性の強力な遺伝子発現により、狙ったステージでの目的遺伝子の検討に有用。
- 増殖細胞だけでなく、静止期の細胞にも感染・発現できる。
また、ヒトだけでなく、マウスやラットを含む多くの動物細胞に効率よく感染できる。 - 高力価のウイルスを得ることができる。
- 動物個体に効率よく遺伝子導入できる。肝臓、あるいは局所投与での遺伝子機能解析に有用。
■チラシをご覧ください。
ウイルスベクター作製サービス
サービス内容
ステップ毎にご注文いただけます。サービス内容詳細はこちらをご覧ください。
○アデノウイルスベクターの作製
○アデノウイルスベクターの作製
- コスミドベクターの構築
- 目的遺伝子を挿入したコスミドベクターを作製＊1
- 挿入遺伝子のサイズ、挿入遺伝子（接続部位を含む）の塩基配列を確認
- 拡大調製によりコスミドベクター40 μg以上を作製
- コスミドベクター内の目的遺伝子全塩基配列を確認（オプション）
- クローン化アデノウイルスベクターの作製
- コスミドベクターより目的遺伝子を含むアデノウイルスDNAを切り出し、293細胞へ導入
- 完全長DNA導入法によりアデノウイルスベクターを作製、確認
- ウイルス株の分離作業により単一株由来の高品質アデノウイルスベクターを高確率で作製
- 培養細胞を用いたin vitro実験を行うのに十分な108～109 IFU/ml、約10 mlのウイルスベクター液を調製
- 生物学的力価測定＊2、RCAチェック
○精製アデノウイルスベクターの調製
- 293細胞を用いたウイルスベクターの拡大調製
- 塩化セシウム密度勾配によるウイルスベクター液の精製
- 動物個体への投与実験（in vivo実験）を行うのに十分な1010～1011 IFU/ml、約4 ml のウイルスベクター液を調製＊3
- 生物学的力価測定＊2、RCAチェック
＊1 鋳型DNAをお持ちでない場合は、ご希望の配列を人工合成により作製することも可能です。
＊2 ウイルスの力価は測定方法により異なります。弊社では、抗体染色法（アデノウイルスのキャプシドタンパク質であるヘキソンタンパク質を免疫染色）によりアデノウイルスベクターの感染力価を測定しています。TCID50（50％ Tissue Culture Infections Dose）法による感染力価の測定も可能ですので、ご相談ください。
＊3 遺伝子の性質等により高力価が得られない場合もあります。
- ご希望量のウイルスベクターを培養のスケールアップにより大量調製（オプション）
○コントロールウイルスベクターの作製も別途承ります
| Axcw2 | 109 IFU/ml 程度 | プロモーターおよび外来遺伝子を含まないコントロールウイルスベクター | |
| AxCAwt2 | 109 IFU/ml 程度 | CAGプロモーターを含み、外来遺伝子を含まないコントロールウイルスベクター | |
| AxCAiLacZ | 109 IFU/ml 程度 | 大腸菌由来のβ-ガラクトシダーゼをレポーター遺伝子として発現 |
価格・納期
サービス項目 |
参考価格 | 参考納期 | |
|---|---|---|---|
| アデノウイルスベクターの作製 | ￥1,200,000 | 1＋2 | 14週間 |
| 1. コスミドベクターの構築 | ￥300,000 | 1件あたり | 5週間 |
| 2. クローン化アデノウイルスベクターの作製 | ￥900,000 | 1件あたり | 9週間 |
| 精製アデノウイルスベクターの調製（1 Lスケール） | ￥1,200,000 | 1件あたり | 8週間 |
納品物
| ・ | コスミドベクターの構築の場合 | コスミドベクター | 40 μg以上 |
| ・ | クローン化アデノウイルスベクターの作製の場合 | ウイルスベクター液 | 108～109 IFU/ml、約10 ml |
| ・ | 精製アデノウイルスベクターの調製の場合 | 精製ウイルスベクター液 | 1010～1011 IFU/ml、～4 ml |
| ・ | 作業報告書 | ||
ご注文方法
-
以下のフォーマットにご記入のうえ、電子メールにてこちらへご送付下さい。
- 以下の手続きの後に実際のサービスを開始します。
- 挿入遺伝子に関する情報を開示ください。
＜遺伝子情報書式用紙 ver.7＞
タカラバイオの遺伝子組換え実験安全委員会への申請に必要な情報（遺伝子産物の性質、塩基配列等）をお知らせいただきます。
電子ファイルに必要事項をご記載後、メールでお送りください。フラッシュメモリやCD-R等の媒体での郵送も受け付けます。
なお、配列情報の郵送、メール送信の際には情報漏洩に充分ご注意ください。（弊社では責任を負いかねます）
情報の扱いには十分注意を払っております。また、情報開示にあたり、秘密保持契約を必要とされる場合はご用意いたします。 - タカラバイオの安全委員会において、開示いただいた遺伝子情報をもとに、必要とされる物理的封じ込めレベルを判断し、折り返しご連絡させていただきます。
P1レベルで扱うことができない遺伝子の場合、サービスをお断りすることになります。
- 挿入遺伝子に関する情報を開示ください。
＜遺伝子情報書式用紙 ver.7＞
受入サンプル
| ・ | コスミドベクターの構築からの場合 | プラスミドDNA | 3 μg以上 |
| ご依頼の配列に基づきプラスミドDNA調整を作製し、プラスミドDNAを構築する作業も別途オプションで承ります。 | |||
| ・ | クローン化アデノウイルスベクターの作製からの場合 | 目的遺伝子搭載コスミドベクター | 20 μg以上 |
| ・ | 精製アデノウイルスベクターの調製からの場合 | ウイルスベクター液 | 109 IFU/ml以上、 300 μl（非増殖型のみ） |
ご留意事項
| ・ | 本作業で作製したアデノウイルスベクターを商業目的で使用される場合には、個別にライセンス契約の締結が必要です。 |
| ・ | アデノウイルスはヒトに感染するウイルスです。挿入されている遺伝子の全塩基配列が既知で、かつ、その遺伝子が毒性あるいは病原性等を示さず安全であると判断できる場合に限りP2レベルで扱うことができます。本サービスでは、P2レベルで扱うことのできる場合のみ、ご依頼をお受けしています。 |
| ・ | お客様よりご提供いただいたサンプル・情報および納品物の複製物は、別途期限を定めている場合を除き、業務終了後3ヵ月を経過すると順次廃棄いたします。ご了承ください。 |
- 注意事項
- 本受託サービスは、個別に合意した場合を除き、すべて研究目的として作業を行います。納品物を試験研究目的以外へご使用される場合、弊社では納品物に起因する損失・損害等については一切の責任を負いかねます。納品物によっては、その構成物（例えば、ベクター、蛍光色素など）の使用に制限がある場合がありますのでご注意ください。
- 納品物に起因して、直接的もしくは間接的に発生したお客様の損害については、明らかに弊社の責に帰すべき事由による場合を除いて、弊社は一切その責任を負いません。
- ウェブサイトに掲載している会社名および商品名などは、各社の商号、または登録済みもしくは未登録の商標であり、これらは各所有者に帰属します。
