アデノウイルスベクター作製

• 高力価・高純度！動物投与に必要な10¹⁰ IFU/mlオーダー以上の高純度クローン化アデノウイルスベクター調製も可能
• 正確！クローン単離により正確なウイルスベクターを作製
• 高発現！強力なCAGプロモーターを搭載
• EF1αプロモーターも選択できます。

1. 一過性の強力な遺伝子発現により、狙ったステージでの目的遺伝子の検討に有用。
2. 増殖細胞だけでなく、静止期の細胞にも感染・発現できる。
   また、ヒトだけでなく、マウスやラットを含む多くの動物細胞に効率よく感染できる。
3. 高力価のウイルスを得ることができる。
4. 動物個体に効率よく遺伝子導入できる。肝臓、あるいは局所投与での遺伝子機能解析に有用。

1. コスミドベクターの構築
   
   • 目的遺伝子を挿入したコスミドベクターを作製^＊1
   • 挿入遺伝子のサイズ、挿入遺伝子（接続部位を含む）の塩基配列を確認
   • 拡大調製によりコスミドベクター40 μg以上を作製
   • コスミドベクター内の目的遺伝子全塩基配列を確認（オプション）
2. クローン化アデノウイルスベクターの作製
   
   • コスミドベクターより目的遺伝子を含むアデノウイルスDNAを切り出し、293細胞へ導入
   • 完全長DNA導入法によりアデノウイルスベクターを作製、確認
   • ウイルス株の分離作業により単一株由来の高品質アデノウイルスベクターを高確率で作製
   • 培養細胞を用いたin vitro実験を行うのに十分な10⁸～10⁹ IFU/ml、約10 mlのウイルスベクター液を調製
   • 生物学的力価測定^＊2、RCAチェック

○精製アデノウイルスベクターの調製

• 293細胞を用いたウイルスベクターの拡大調製
• 塩化セシウム密度勾配によるウイルスベクター液の精製
• 動物個体への投与実験（in vivo実験）を行うのに十分な10¹⁰～10¹¹ IFU/ml、約4 ml のウイルスベクター液を調製^＊3
• 生物学的力価測定^＊2、RCAチェック
  
  

  ＊1 鋳型DNAをお持ちでない場合は、ご希望の配列を人工合成により作製することも可能です。

  ＊2 ウイルスの力価は測定方法により異なります。弊社では、抗体染色法（アデノウイルスのキャプシドタンパク質であるヘキソンタンパク質を免疫染色）によりアデノウイルスベクターの感染力価を測定しています。TCID50（50％ Tissue Culture Infections Dose）法による感染力価の測定も可能ですので、ご相談ください。
  

  ＊3 遺伝子の性質等により高力価が得られない場合もあります。

• ご希望量のウイルスベクターを培養のスケールアップにより大量調製（オプション）

○コントロールウイルスベクターの作製も別途承ります

• 以下のフォーマットにご記入のうえ、電子メールにてこちらへご送付下さい。
  
  • ウイルスベクター作製受託依頼書（Excel）
• 以下の手続きの後に実際のサービスを開始します。
  
  1. 挿入遺伝子に関する情報を開示ください。 ＜遺伝子情報書式用紙 ver.7＞
     タカラバイオの遺伝子組換え実験安全委員会への申請に必要な情報（遺伝子産物の性質、塩基配列等）をお知らせいただきます。
     電子ファイルに必要事項をご記載後、メールでお送りください。フラッシュメモリやCD-R等の媒体での郵送も受け付けます。
     なお、配列情報の郵送、メール送信の際には情報漏洩に充分ご注意ください。（弊社では責任を負いかねます）
     情報の扱いには十分注意を払っております。また、情報開示にあたり、秘密保持契約を必要とされる場合はご用意いたします。
  2. タカラバイオの安全委員会において、開示いただいた遺伝子情報をもとに、必要とされる物理的封じ込めレベルを判断し、折り返しご連絡させていただきます。
     P1レベルで扱うことができない遺伝子の場合、サービスをお断りすることになります。