Apoptotic & Necrotic Cell Detection Kits

アポトーシスとネクローシスは細胞死に至る主要な2つのプロセスである。アポトーシスは様々な因子によって誘発される積極的かつ遺伝的に制御された「細胞の自殺」である。アポトーシスの過程では、細胞膜の外膜のリン脂質含量の変化など、様々な現象が引き起こされる。ホスファチジルセリン (PS) は細胞の内膜から外膜上へと移行し、食細胞がこれを認識する。リン脂質タンパク質であるアネキシンVは、PSに対して高い親和性を持ちアポトーシス細胞の外膜に露出したPSと特異的に結合する。そのため、アネキシンVを用いて、アポトーシス細胞を簡単かつ確実に検出することができる。フルオレセイン (FITC) などでアネキシンⅤをラベルすると、アポトーシス細胞は明るい緑色に染色される。
ネクローシスは通常は厳しい細胞傷害に起因する。細胞内小器官も細胞膜も破壊され、細胞の内容物は周辺環境へと流出する。エチジウムホモダイマーIII (EthD-III) は膜不透過性の核酸プローブで、生細胞やアポトーシス細胞は染色されないが、ネクローシス細胞は強い赤色に染色される。EthD-IIIはDNAに対して非常に強い親和性があり蛍光量子収率が高いため、他の細胞染色キットで一般的に使われているヨウ化プロピジウム (PI) やエチジウムホモダイマーⅠ (EthD-I)に代わる優れた試薬である。

Apoptotic/Necrotic Cells Detection Kitはフローサイトメーターや蛍光顕微鏡を用いて同じ細胞集団内のアポトーシス細胞 (緑色) とネクローシス細胞 (赤色) を定量するための簡便なキットである。

内容

FITC-Annexin V(in TE buffer containing 0.1% BSA and 0.1% NaN3, pH 7.5)
Ethidium Homodimer III(200 μM in PBS)
5X Binding Buffer

保存

4℃で遮光保存。凍結不可

Apoptotic/Necrotic/Healthy Cells Detection Kitはアポトーシス細胞、ネクローシス細胞の染色試薬に加えて、生細胞集団を定量するための膜透過性青色蛍光DNA染色試薬 (Hoechst 33342) も含む。フローサイトメーターまたは蛍光顕微鏡を用いて同じ細胞集団のアポトーシス細胞（緑色）、ネクローシス細胞（赤色）、生細胞 (青色) を同時に定量することができる。


図1. Apoptotic/Necrotic/Healthy Cells Detection Kitを用いたアポトーシス細胞（緑色）、ネクローシス細胞（赤色）、生細胞（青色）の蛍光染色

内容

FITC-Annexin V: 250 μl (in TE buffer containing 0.1% BSA and 0.1% NaN3, pH 7.5)
Ethidium Homodimer III (200 μM in PBS)
5×Binding Buffer
Hoechst 33342: 250 μl (500 μg/ml in PBS)

保存

4℃で遮光保存。凍結不可