操作フローチャート
| 精米20粒 | |
| ┃← | 滅菌 MilliQ 水 540 μl添加 |
| ┣━ | 一晩放置（室温、25℃付近が望ましい） |
| ┃← | Lysis Buffer A 300 μl添加 |
| ┣━ | 米粒の粉砕 |
| ┃← | Lysis Buffer B 120 μl添加 |
| ┃← | Proteinase K（製品コード 9034）を50 μl添加 |
| ┣━ | 55℃、1時間放置 |
| （10分後、20分後、40分後に再懸濁） | |
| ┣━ | 11,200×g*1、5分間、4℃にて遠心 |
| ┣━ | 上清 470μl と Precipitation Buffer 147 μlの混和 |
| （上清回収の際、液表層の浮遊物を出来るだけ回収しないように注意） | |
| ┣━ | 氷中10分間放置（途中1回および遠心前に、再度転倒混和） |
| ┣━ | 11,200×g*1、10分間、4℃にて遠心 |
| ┃← | 上清150 μlと1 μlの100 mg/ml RNase Aを混合 |
| ┣━ | 55℃、5分間放置。 |
| ┃← | DNA Binding Buffer 添加 |
| ┣━ | Miniprep Spin カラムへの添加。 |
| （約500 μl添加し、室温にて10,000×g*1、1分間遠心。2回実施する。 | |
| ┃← | 1st Wash Buffer*2 をカラムに500 μl添加し、室温にて10,000×g*1、1分間遠心 |
| ┃← | 2nd Wash Buffer*3 をカラムに600 μl添加し、室温にて10,000×g*1、1分間遠心 |
| ┃← | 2nd Wash Buffer*3 をカラムに400 μl添加し、室温にて12,700×g*1、3分間遠心 |
| ┣━ | 65℃ に温めた Elution Buffer 50 μlをカラムに添加し、室温5分間放置 |
| ┣━ | 室温にて7,000×g*1、1分間遠心 |
| 回収液 | （米 DNA溶液） |
| *1 | 遠心力はローター最小径での値である。 |
| *2 | 1st Wash Buffer Wash Buffer Aのボトル1本につき 2-プロパノール 7.5 mlを添加、充分に混合して調製してください。 添加後は、溶液成分が揮発しないように蓋を充分に締め、20～25℃にて保存してください。 |
| *3 | 2nd Wash Buffer Wash Buffer Bのボトル1本につき エタノール（99.5％ 以上）21 mlを添加、充分に混合して調製してください。 添加後は、溶液成分が揮発しないように蓋を充分に締め、20～25℃にて保存してください。 |
