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Application

TaKaRa One Step RNA PCR Kit (AMV)

HL60由来total RNAよりTFR領域1 kb、 2 kb、 4.4 kbの増幅

[方法]
  1. Standard protocolで 記載している一般的なRT-PCR法にしたがって反応液を調製した。
  2. 調製後、サーマルサイクラーにセットし、次のプログラムで反応を行った。                                 
    50℃ 30 min.
    94℃ 2 min.
    94℃ 30 sec.
     
     
    60℃ 30 sec.  30 cycles
    72℃ 5 min.  
    (TaKaRa PCR Thermal Cycler MPを使用)

  3. 反応終了後アガロースゲル電気泳動を行った。

    [結果]
    4.4 kbまで効率良く増幅された。 図には示していないが、5.6 kbでも増幅されることを確認している。

    図 ヒトトランスフェリンレセプターmRNAの増幅
    レーン
     M: λHindIIIマーカー
     1: 1kb
     2: 2kb
     3: 4.4kb
     8μlアプライ
     1% アガロースゲル
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