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Application

TaKaRa One Step RNA PCR Kit (AMV)

TaKaRa RNA LA PCR Kit Ver. 1.1との感度比較

[方法]
1) サンプルとしてTaKaRa RNA LA PCR Kit Ver. 1.1(製品コード RR012A)に添付のPositive Control RNA(2×105 copies/μl)を段階的に希釈し各種の濃度で用い、Standard Protocolに従って反応液を調製する。
2) 下記のプログラムに従って反応を行う。
RNA LA PCR Kit Ver. 1.1
  RT反応 : 50℃15分、95℃5 分、5℃5分
  反応後、PCR反応液を添加して次の反応に進む。
  PCR反応 : 94℃30秒、60℃30秒、72℃1分(30サイクル)

One Step RNA PCR Kit(AMV)
  RT反応 : 50℃15分、94℃2分
  PCR反応 : 94℃30秒、60℃30秒、72℃1分(30サイクル)

 (TaKaRa PCR Thermal Cycler MPを使用)
[結果]
図に示すように、One Step RNA PCR Kit(AMV)は、RNA LA PCRTM Kit Ver. 1.1と同等の感度を示し、5×102コピーまでバンドが確認できた。
                
レーン レーン
1: Negative control(水)5:5×103コピー
2: 5×100コピー6:5×104コピー
3: 5×101コピー7:5×105コピー
4: 5×102コピーM:100 bp DNA Ladder
 12 μlアプライ
 3% アガロースゲル
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