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抗オステオカルシンモノクローナル抗体を用いた免疫組織染色の例

Anti-Bovine Osteocalcin, Monoclonal(製品コード M041、M042、M043、M044)は、ウシ骨由来のオステオカルシン(OC)に対するモノクローナル抗体であるが、ヒト由来のOCとも同等に反応する。下記は、各種抗OCモノクローナル抗体を用いて、ヒト骨腫瘍のパラフィン切片を免疫組織染色した例である。

【方法】
一次抗体 200倍希釈(10 μg/ml)
組織切片 Chondroma, Synovial Sarcoma(Novagen社)
検出方法 ENVISION Plus(DAKO社)
操作手順 1)脱パラフィン
2) 賦活処理(プロテイナーゼK処理)
プロテイナーゼK 0.4 mg/ml、室温5分
3) 内因性ペルオキシダーゼのブロッキング
3% H2O2室温5分
4) 非特異性のブロッキング
ブロックエース(原液)、室温20分
5) 一次抗体反応、室温60分
6) ENVISION Plus、室温30分
7) DAB発色
8) 核染色(ヘマトキシリン)
9) 脱水・透徹・封入


【結果】

  Chondroma Synovial Sarcoma
(部位A)
Synovial Sarcoma
(部位B)
OC4-30
(製品コード M041)
OCG2
(製品コード M042)
OCG3
(製品コード M043)
OCG4
(製品コード M044)
OC4-5
Chondroma Hybrid-Ready Tissues/Human Disease Tissues/Bone Tumor
(Novagen Code 70305-3)
Synovial Sarcoma Hybrid-Ready Tissues/Human Disease Tissues/Osteosarcoma
(Novagen Code 70386-3)
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