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ヒト口腔粘膜細胞から調製したDNA抽出液によるリアルタイムPCR(サイクリングプローブ法)

(製品コード 9180)
ヒト口腔粘膜細胞より標準プロトコールを用いて調製した抽出液を使用し、Cycleave Human ALDH2 Typing Probe/Primer Set Ver.2(製品コード CY403)によりALDH2のタイピングを行った。抽出液の原液から100倍希釈液まで正確な判定が行えた。下図の結果より、今回はヘテロと判定された。




  実線:抽出液原液、破線:10倍希釈液、点線:100倍希釈液

ヒト口腔粘膜細胞回収方法
(1)口腔内を滅菌済み綿棒で数回拭う。
(2)綿棒をPBS入りのチューブ内で洗い、細胞を懸濁する。
(3)3,500 rpm、5分間の遠心により細胞を回収する。

リアルタイムPCR試薬:Cycleave Human ALDH2 typing Probe/Primer set(製品コード CY403)
               CycleavePCR Reaction Mix(製品コード CY505A)
DNA抽出液使用量:2 μl
ターゲット:ALDH のタイピング
装置:Thermal Cycler Dice Real Time System

PCR条件:
95℃  10 sec.
  
95℃5 sec.
45 cycles
53℃15 sec.
72℃15 sec.
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