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ダイレクトPCR例5:米粒

MightyAmp DNA Polymerase Ver.2(製品コード R071A/B)
・ターゲット Chloroplast DNA highly conserved region 297 bp
・PCR条件
98℃ 2分
 
98℃ 10秒
 
30 cycles
60℃ 15秒
68℃ 30秒
TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice Gradient(製品コード TP600)使用

レーン
サンプル
1ササニシキ玄米1粒/100 μl PCR反応系
M100 bp DNA Ladder

電気泳動量5 μl
ゲル2 % NuSieve 3:1 Agarose

参考

レーン
PCR後の反応液残量結果
1玄米1粒/50 μl PCR反応系35 μl×
2玄米1粒/100 μl PCR反応系85 μl
3精米1粒/50 μl PCR反応系5 μl×
4精米1粒/100 μl PCR反応系40 μl×
M100 bp DNA Ladder

電気泳動量5 μl
ゲル2 % NuSieve 3:1 Agarose

精米を使用すると、米が水分を大量に吸ってしまい反応組織が大幅に変わってしまうため増幅できません。
米粒からのダイレクトPCRには玄米を使用してください。
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