EHEC (O antigens) PCR Typing Kit

大腸菌のO 血清群はデンマーク国立血清学研究所（Statens Serum Institut: SSI）により現在のところO1からO187までが定められており、3種類の亜（O18ab/ac、 O28ab/ac、O112ab/ac）と6種類の欠番（O31、O47、O67、O72、O94、O122）があるために184種類のO血清群が認められている。本評価ではそれら全184種類のSSI由来参考株から精製したゲノムDNAを用いた。それぞれのDNA濃度を5 ng/μlに調整したプールDNA（5種類のDNAを混和－表1：PT01～PT37）を用いて特異性の評価を行った。O血清群に対するPCR増幅産物（バンド）が確認されたプールDNA（PT06、PT20、PT22、PT24、PT29、PT31、PT33）について（図1）、各プールに含まれる5種類の単独DNAを用いて再度増幅の確認を行った（図2）。その結果、判定に関わる範囲内（100～1,500 bp）において非特異的なバンドは確認されず、7種類の対象O血清群株のみでバンドが確認された。以上の結果より、本キットの各対象O血清群に対する特異性が確認された。



図1．全プールDNA を用いたPCR キットの結果

図2．単独DNAを用いたPCRキットの結果（プールDNAでバンドが検出されたもののみ）

表1．参考株とプールDNA番号の対応表