この画面を閉じる

Application

アプリの部屋Topへ

ヒト由来cDNAを鋳型としたqPCR反応比較(2)

方法
ヒト由来cDNAを鋳型として各社高速反応タイプのリアルタイムPCR試薬を用いて反応を行った。

使用機器: Thermal Cycler Dice Real Time System II製品コード TP900/TP960
弊社試薬: Prime Script RT reagent Kit (Perfect Real Time)(製品コード RR037A/B
       TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus)(製品コード RR420S/A/B
Template: HL60 total RNA Primers : Perfect Real Timeサポートシステム(PRTSS)で設計
<リアルタイム反応条件>
Holding
     1 cycle
     95℃、30秒
2 Step PCR
     40 cycles
     95℃、5秒
     60℃、30秒
Dissociation


反応組成) <1反応あたり>
試薬使用量最終濃度
TB Green Premix Ex Taq II(2×)12.5 μl
PCR Forward Primer(10 μM)0.5 μl0.2 μM
PCR Reverse Primer(10 μM)0.5 μl0.2 μM
Template(cDNA合成反応液)2 μl 
滅菌精製水9.5 μl
total25 μl 
結果
ヒト由来cDNAを鋳型としたqPCR反応比較(2)の結果
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) は他社の同タイプ(高速反応タイプ)に比べて非特異的増幅が起こりにくく、より正確な定量が可能であった。
この画面を閉じる