高効率遺伝子導入の決定版

組換えアデノウイルスベクター作製

■お問い合わせ窓口(B)

TEL:077-565-6999


[サンプル送付先]
タカラバイオ株式会社 CDMセンター 細胞工学研究 受託受付担当 宛て
〒525-0058 滋賀県草津市野路東七丁目4番38号
TEL:077-567-9262
ご注意:伝票の品名に受託名をご記載ください。 お問い合わせフォームは こちら

特長

  • 高力価・高純度!動物投与に必要な1010 IFU/mlオーダー以上の高純度クローン化組換えウイルスベクターを提供
  • 正確!クローン単離により正確な組換えウイルスベクターを作製
  • 高発現!強力なCAGプロモーターを搭載
  • EF1αプロモーターも選択できます。

概要

東京大学医科学研究所の齋藤泉博士らにより開発された高効率なアデノウイルス作製法(完全長DNA導入法)を利用した組換えアデノウイルス作製キットAdenovirus Dual Expression Kit(製品コード 6170)Adenovirus Dual Expression Kit (EF1α)(製品コード 6174)を用いて、目的遺伝子を導入した組換えアデノウイルスベクターを作製いたします。

アデノウイルスベクターを用いた遺伝子導入法は、以下の利点を持ち、多くの遺伝子導入実験に利用されています。
  1. 一過性の強力な遺伝子発現により、狙ったステージでの目的遺伝子の検討に有用。
  2. 増殖細胞だけでなく、静止期の細胞にも感染・発現できる。
    また、ヒトだけでなく、マウスやラットを含む多くの動物細胞に効率よく感染できる。
  3. 高力価のウイルスを得ることができる。
  4. 動物個体に効率よく遺伝子導入できる。肝臓、あるいは局所投与での遺伝子機能解析に有用。

アデノウイルス作製法(完全長DNA導入法)
■チラシをご覧ください。
組換えウイルス作製サービス

サービス内容

ステップ毎にご注文いただけます。サービス内容詳細はこちらをご覧ください。 ○組換えアデノウイルスベクターの作製
  1. コスミドの構築
    • 目的遺伝子発現プラスミドを用いて目的遺伝子を挿入した組換えコスミドを作製
    • 挿入遺伝子のサイズ、挿入接続部位の塩基配列を確認
    • 拡大調製により組換えコスミド40 μg 以上を作製
    • 組換えコスミド内の目的遺伝子全塩基配列を確認(オプション)
  2. 組換えアデノウイルスベクターの確認 ※ウイルスは納品物に含まれません。
    • 組換えコスミドより目的遺伝子を含む組換えアデノウイルスゲノムを切り出し、293細胞へ導入
    • 完全長DNA導入法による組換えアデノウイルスベクターを作製、確認
  3. クローン化組換えアデノウイルスベクターの作製
    • ウイルス株の分離作業により単一株由来の高品質のアデノウイルスベクターを高確率で作製
    • 培養細胞を用いたin vitro実験を行うのに十分な108~109 IFU/ml、約10 mlのウイルスベクター液調製
    • 生物学的力価測定、RCAチェック、構造確認

○精製組換えアデノウイルスベクターの調製

  • 293細胞を用いたウイルスベクターの拡大調製
  • 塩化セシウム密度勾配によるウイルスベクター液の精製
  • 動物個体への投与実験(in vivo実験)を行うのに十分な1010~1011 IFU/ml、約4 ml のウイルスベクター液調製
  • 生物学的力価測定、RCAチェック、構造確認

    ウイルスの力価は測定方法により異なります。弊社では、抗体染色法(アデノウイルスのキャプシドタンパク質であるヘキソンタンパク質を免疫染色)により組換えアデノウイルスベクターの感染力価を測定しています。TCID50(50% Tissue Culture Infections Dose)法による感染力価の測定も可能ですので、ご相談ください。
    ただし、遺伝子の性質等により高力価が得られない場合もあります。

  • ご希望のウイルスを培養のスケールアップにより大量調製(オプション)

○コントロールウイルスの作製も別途承ります

Axcw2 109 IFU/ml 程度 プロモーターおよび外来遺伝子を含まないコントロールウイルス
AxCAwt2 109 IFU/ml 程度 CAGプロモーターを含み、外来遺伝子を含まないコントロールウイルス
AxCAiLacZ 109 IFU/ml 程度 大腸菌由来のβ-ガラクトシダーゼをレポーター遺伝子として発現

価格・納期

サービス項目
参考価格 参考納期
組換えアデノウイルスの作製 ¥1,200,000 1+2+3 12週間
1. コスミドの構築 ¥300,000 1件あたり 4週間
2. 組換えアデノウイルスの確認 ¥300,000 1件あたり 3週間
3. クローン化組換えアデノウイルスの作製 ¥600,000 1件あたり 6週間
組換えアデノウイルスの精製 ¥1,200,000 1件あたり 8週間

納品物

コスミドの構築の場合 組換えコスミド 40 μg以上
クローン化組換えアデノウイルスベクターの作製の場合 組換えウイルスベクター液 108~109 IFU/ml、約10 ml
精製組換えアデノウイルスベクターの調製の場合 精製組換えウイルスベクター液 1010~1011 IFU/ml、~4 ml
作業報告書

ご注文方法

  • 以下のフォーマットにご記入のうえ、依頼書記載のFAX番号へご送付ください。

  • 以下の手続きの後に実際のサービスを開始します。
    手続きに必要な書類(<>内)をダウンロードしてご使用ください。
    1. 挿入遺伝子に関する情報を開示ください。 <遺伝子情報書式用紙 ver.6 : 2つのsheetがあります>
      タカラバイオ遺伝子組換え実験安全委員会への申請に必要な情報(遺伝子産物の性質、塩基配列等)をお知らせいただきます。
      電子ファイルに必要事項をご記載後、こちらにメールでお送りください。フラッシュメモリやCD-R等の媒体での郵送も受け付けます。
      なお、配列情報の郵送、メール送信の際には情報漏洩に充分ご注意ください。(弊社では責任を負いかねます)
      情報の扱いには十分注意を払っております。また、<覚書>には秘密保持条項が含まれていますが、情報開示にあたり、特に、秘密保持契約を必要とされる場合はご用意いたします。
    2. タカラバイオ安全委員会において、開示いただいた遺伝子情報をもとに、必要とされる物理的封じ込めレベルを判断し、折り返しご連絡させていただきます。
      P2レベル以下で扱うことができない場合、サービスをお断りすることになります。

受入サンプル

コスミドの構築からの場合 プラスミドDNA 1 μg以上

ご依頼の配列に基づき人工合成遺伝子を作製し、プラスミドDNAを構築する作業も別途オプションで承ります。
組換えアデノウイルスベクターの確認からの場合 コスミドDNA 1 μg以上
精製組換えアデノウイルスベクターの調製からの場合 組換えウイルスベクター液 109 IFU/ml以上、
300 μl(非増殖型のみ)

種ウイルスをご供与いただく場合には、送付に関するお願いをお読みいただき、ウイルスに関する情報をご提供ください。
以下のフォーマットにご記入のうえ、依頼書記載のFAX番号へご送付ください。

ご留意事項

本作業で作製した組換えアデノウイルスを商業目的で使用される場合には、個別にライセンス契約の締結が必要です。
アデノウイルスはヒトに感染するウイルスです。挿入されている遺伝子の全塩基配列が既知で、かつ、その遺伝子が毒性あるいは病原性等を示さず安全であると判断できる場合に限りP2レベルで扱うことができます。本サービスでは、P2レベルで扱うことのできる場合のみ、ご依頼をお受けしています。
お客様よりご提供いただいたサンプル・情報および納品物の複製物は、別途期限を定めている場合を除き、業務終了後3ヵ月を経過すると順次廃棄いたします。ご了承ください。

ライセンス情報

L31 Adenovirus Dual Cosmid
This product is the subject of U.S. Patent No. 8,216,833 and its foreign counterparts.

この製品を見た人は、こんな製品も見ています。

注意事項
  • 本受託サービスは、すべて研究目的として作業を行います。納品物を試験研究目的以外へご使用される場合、弊社では納品物に起因する損失・損害等については一切の責任を負いかねます。納品物によっては、その構成物(例えば、ベクター、蛍光色素など)の使用に制限がある場合がありますのでご注意ください。
  • 納品物に起因して、直接的もしくは間接的に発生したお客様の損害については、明らかに弊社の責に帰すべき事由による場合を除いて、弊社は一切その責任を負いません。

▲このページのトップへ