CRISPR/Cas9システムを用いたノックアウト動物作製

ゲノム編集による動物作製

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特長

  • CRISPR/Cas9システムを利用したノックアウト/ノックインしたマウス・ラットを作製
  • Tg動物作製の実績豊富な日本エスエルシー社(業務提携先)と連携した動物作製作業を実施
  • sgRNA、ノックインオリゴ(ssODN)の設計、作製から承ります

概要

RNA guided endonucleaseはバクテリアの獲得免疫システムであるCRISPR/Cas9システム由来のRNA誘導型人工ヌクレアーゼで、従来型の人工ヌクレアーゼとは異なり、ガイドRNA(gRNA:guide RNA)とCas9エンドヌクレアーゼ(タンパク質)の二つの異なる分子が、標的DNA配列の認識とDNA二本鎖切断の働きをそれぞれ別々に担います。こうした特徴から、従来型人工ヌクレアーゼに対しRNA guided endonucleaseの設計が比較的容易である一方、本法は、従来技術と同等のゲノム編集効果が得られること、ならびに、複数箇所の同時ゲノム編集が容易に行えることなどから、新たなゲノム編集法として注目を集めています。

タカラバイオを窓口として、日本エスエルシー社(業務提携先)およびタカラバイオによるノックアウト/ノックインマウスおよびラットの作製受託サービスを提供いたします。従来のトランスジェニック動物作製法と比較して、高効率かつ短期間でゲノム編集動物の作製が可能です。また高効率なCas9 recombinaseを用いたエレクトロポレーション法でもゲノム編集動物の作製が可能です。

■チラシをご覧ください。
ゲノム編集受託サービス

サービス内容

  • sgRNA(single-guide RNA)設計・作製サービス
    GenBank Accession番号、生物種などのターゲット遺伝子情報からsgRNA配列を設計します。設計した配列より In Vitro TranscriptionにてsgRNAを作製します。

  • CRISPR/Cas9システムを利用したノックアウト/ノックインマウスまたはラットの作製(マイクロインジェクション)
    C57BL/6NCrSlcマウスあるいはSlc:SDラットなどの受精卵にsgRNAおよびCas9 mRNAをマイクロインジェクション法で導入します(ノックイン動物作製の場合、ssODNも導入します)。インジェクション後、状態の良好な胚を仮親マウス(あるいはラット)の卵管に移植します。妊娠した仮親より産仔を獲得し、抽出を行ったマウスゲノムから、編集領域のダイレクトシーケンスを行い、ファウンダー候補結果をご報告いたします。ご希望のマウス(あるいはラット)を納品又は次世代(F1)作製へ移行します。

    CRISPR/Cas9システムを利用したノックアウトマウスおよびノックアウトラットの作製(マイクロインジェクション)

  • CRISPR/Cas9システムを利用したノックアウトマウスおよびノックアウトラットの作製(エレクトロポレーション)
    C57BL/6NCrSlcマウスあるいはSlc:SDラットなどの受精卵にsgRNAおよびCas9 recombinaseをエレクトロポレーション法で導入します。エレクトロポレーション後、状態の良好な胚を仮親マウス(あるいはラット)の卵管に移植します。妊娠した仮親より産仔を獲得し、得られたすべてのマウス(あるいはラット)を納品します。

  • CRISPR/Cas9システムを利用したノックインマウスおよびノックインラットの作製(エレクトロポレーション)
    C57BL/6NCrSlcマウスあるいはSlc:SDラットなどの受精卵にsgRNA、Cas9 recombinaseおよびssODNをエレクトロポレーション法で導入します。エレクトロポレーション後、状態の良好な胚を仮親マウス(あるいはラット)の卵管に移植します。妊娠した仮親より産仔を獲得し、得られたすべてのマウス(あるいはラット)を納品します。
【オプションサービス】

価格・納期

サービス項目 参考価格 参考納期
ノックアウト動物(F0)の作製
(マイクロインジェクション)
¥1,850,000~ 1件あたり 約4.5ヵ月~
ノックアウト動物(F0)の作製
(エレクトロポレーション)
¥1,900,000~ 1件あたり 約4.5ヵ月~
ノックイン動物(F0)の作製
(ssODN利用)
¥1,880,000~ 1件あたり 約4.5ヵ月~
次世代(F1)以降の動物作製 別途ご相談
(TAクローニングによるシーケンス解析) ¥480,000~ 5クローンあたり 4週間
ダイレクトシーケンス(DNA精製・20匹程度まで) ¥600,000    1件あたり 4週間
(ダイレクトシーケンスのPCR条件検討) ¥112,000    1領域あたり 1~2週間
 日本エスエルシー社での作業となります。
※ 本作業は、ご要望の作業仕様により価格が変動いたします。

納品物

  • 作業報告書
  • 編集動物

ご注文方法

以下のフォーマットにご記入のうえ、依頼書記載のFAX番号へご送付ください。

受入サンプル

・遺伝子、対象動物などの情報

ご留意事項

  • 本サービスはタカラバイオ提携の日本エスエルシー社で実施し、タカラバイオが販売するサービスです。納品物は研究用途においてのみご使用いただけます。
  • お客様よりご提供いただいたサンプル・情報および納品物の複製物は、別途期限を定めている場合を除き、業務終了後3ヵ月を経過すると順次廃棄いたします。ご了承ください。

ライセンス情報

本作業および納品物に関するライセンス情報については、こちらをご確認ください。
License Statement No. K102
License Statement No. K118

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注意事項
  • 本受託サービスは、すべて研究目的として作業を行います。納品物を試験研究目的以外へご使用される場合、弊社では納品物に起因する損失・損害等については一切の責任を負いかねます。納品物によっては、その構成物(例えば、ベクター、蛍光色素など)の使用に制限がある場合がありますのでご注意ください。
  • 納品物に起因して、直接的もしくは間接的に発生したお客様の損害については、明らかに弊社の責に帰すべき事由による場合を除いて、弊社は一切その責任を負いません。

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