クロンテック独自のブレンド型酵素

Advantage® 2 ポリメラーゼミックス & PCR キット

  • 独自のブレンド型酵素;極めて高い収量と感度、ならびにTaqポリメラーゼに比べ3倍高い正確性を提供
  • ヒトゲノムDNAから5.9 kbの増幅を確認
  • 最適化したバッファーにより条件検討はほぼ不要
  • ホットスタート抗体により反応液を室温調製でき、反応特異性もアップ
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
CLN 639201 Z9201N Advantage® 2 Polymerase Mix
  • ライセンス
100回 ¥35,700
説明書・データシート・ベクター情報
CLN 639202 Z9202N Advantage® 2 Polymerase Mix
  • ライセンス
500回 ¥151,200
説明書・データシート・ベクター情報
CLN 639207 Z9207N Advantage® 2 PCR Kit
  • ライセンス
30回 ¥20,000
説明書・データシート・ベクター情報
CLN 639206 Z9206N Advantage® 2 PCR Kit
  • ライセンス
100回 ¥60,900
説明書・データシート・ベクター情報
CLN 639137 Z9137N 10× Advantage® 2 PCR Buffer
600 μl×2 ¥10,500
CLN 639138 Z9138N 10× Advantage® 2 PCR Buffer
10 ml ¥22,100
CLN 639148 Z9148N 10× Advantage® 2 SA PCR Buffer
10 ml ¥22,100
Advantage 2 Polymerase Mixは、鋳型のサイズが大きい場合や、より高い正確性と性能のPCRが必要な実験での使用に適している。Advantage 2は、野生型のTaqポリメラーゼよりも正確性が3倍高く、非常に用途が広いポリメラーゼミックスで、cDNAをはじめさまざまな鋳型DNAを簡単に増幅できる(図1)。
Advantage 2 Polymerase Mixには、以下の成分が含まれている。
Titanium Taq DNA Polymerase
Taqよりも高い収量と感度を有し、TaqStart Antibodyを使用するホットスタートPCRを実現。 反応液の室温調製が可能で、反応特異性も向上する。(1、2)
校正用ポリメラーゼ
PCRによる増幅サイズの改善(図2)と正確性の向上(3)を目的として、少量の校正用ポリメラーゼが含まれている。
Advantage 2 Polymerase Mixは、SMARTer RACE cDNA Amplifcation Kit、SMARTer Pico PCR cDNA Synthesis Kit、Clontech PCR-Select Subtraction KitなどPCRを利用するClontechの各種キットとの併用にも適している。

図1. Advantage 2 Polymerase Mixおよび他社Taqポリメラーゼによる腫瘍壊死因子受容体II(TNFR II)cDNAの増幅
各ポリメラーゼで得られたPCR産物5 μlを用いて、1.1 %アガロース/EtBrゲルで電気泳動を行った。Advanatge 2を用いた場合にのみ0.4 kb TNFR II断片の増幅が認められた。
レーン1:Advantage 2 レーン2:他社Taqポリメラーゼ レーンM:DNAサイズマーカー


図2. Advantage 2 Polymerase Mixによるサイズの大きい各種鋳型からの増幅
以下に示す条件で得られたPCR産物1~3 μlを用いて、1.1%アガロース/EtBrゲルで電気泳動を行った。
レーン1:2.5 kbのE.coli DNAポリメラーゼ遺伝子をゲノムDNAから増幅
レーン2:3.5 kbのウシ膵臓トリプシンインヒビター遺伝子を仔ウシ胸腺のゲノムDNAから増幅
レーン3:5.9 kbのヒトIL-1β遺伝子をヒトゲノムDNAから増幅
レーン4:8.5 kbのヒトティチンcDNAをヒト骨格筋SMART cDNAライブラリーから増幅
レーン5:18.5 kbのλインサートをλクローンから増幅
レーンM:λ-Hind III DNAサイズマーカー

用途

・cDNA増幅
・ライブラリー構築

PCR産物について

Advantage 2 Polymerase Mixを用いて増幅したPCR産物のほとんどは、3’末端にAが1塩基付加されている。したがって、そのPCR産物をそのままT-Vector[pMD20(製品コード 3270)、pMD19 (Simple)(製品コード 3271)など]にクローニングすることができる。また、末端平滑化およびリン酸化を行って、平滑末端のベクターにクローニングすることも可能である。

備考

Advantage 2 Polymerase Mixには10× Advantage 2 PCR Buffer、10× Advantage 2 SA PCR Bufferを添付。
キットにはAdvantage 2 Polymerase Mix、10× Advantage 2 PCR Buffer、10× Advantage 2 SA PCR Buffer、dNTP Mix、コントロール用鋳型とプライマー、PCR-grade H2Oが含まれる。
Advantage 2 SA PCR Bufferは~2 kbの増幅に最適。

保存

-20℃

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