PCR酵素とコンピテントセルが入ったオールインワンキット

In-Fusion® HD Cloning Plus

  • 任意のベクターの任意の位置にディレクショナルクローニングが可能
  • ベクターの末端配列15塩基を目的DNA増幅用プライマーに付加してPCR産物を調製するだけ
  • 余分な配列をいっさい付加しない
  • 15 kb断片のクローニング実績あり。複数断片の同時クローニングも可能
  • ハイスループットクローニングにも最適
  • 世界中の研究室で広く利用されている
  • EcoDryはIn-Fusion反応液がマイクロチューブに分注済みの凍結乾燥タイプ
  • 高正確性PCR酵素とコンピテントセルが入ったオールインワンキット

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In-Fusionクローニング製品選択ガイド

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
CLN 638909 Z8909N In-Fusion® HD Cloning Plus
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
10回 ¥47,400
¥37,920
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638910 Z8910N In-Fusion® HD Cloning Plus
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
50回 ¥170,000
¥136,000
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638911 Z8911N In-Fusion® HD Cloning Plus
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
100回 ¥267,800
¥214,240
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638920 Z8920N In-Fusion® HD Cloning Plus
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
96回 ¥257,500
¥206,000
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638916 Z8916N In-Fusion® HD Cloning Plus CE
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
10回 ¥45,300
¥36,240
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638917 Z8917N In-Fusion® HD Cloning Plus CE
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
50回 ¥159,700
¥127,760
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638918 Z8918N In-Fusion® HD Cloning Plus CE
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
100回 ¥257,500
¥206,000
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638919 Z8919N In-Fusion® HD Cloning Plus CE
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
96回 ¥247,200
¥197,760
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638912 Z8912N In-Fusion® HD EcoDry™ Cloning Plus
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
8回 ¥38,100
¥30,480
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638913 Z8913N In-Fusion® HD EcoDry™ Cloning Plus
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
24回 ¥97,900
¥78,320
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638914 Z8914N In-Fusion® HD EcoDry™ Cloning Plus
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
48回 ¥175,100
¥140,080
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638915 Z8915N In-Fusion® HD EcoDry™ Cloning Plus
  • クローニング関連製品、In-Fusion サマーキャンペーン
  • ライセンス
96回 ¥252,400
¥201,920
2017/07/03~
2017/08/31

説明書・データシート・ベクター情報

※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。

製品説明

Clontech社のIn-Fusionクローニングシステムは、それぞれのDNA断片の末端15塩基が相同であれば、短時間に効率よく、In-Fusion酵素がそれらのDNA断片を融合することができる。制限酵素切断や平滑末端化処理、リガーゼ反応などを行うことなく、1ステップの反応でPCR断片を任意のベクターにクローニングできる。In-Fusion HD Cloning Kitはプレミックスタイプであり、反応時間はわずか15分、クローニング効率が高く、質の高いクローニングを行える。
効率のよいIn-Fusionクローニングなら、最小限のスクリーニングで適切なクローンが得られる。また、2つのDNA断片の結合のみならず、1度の反応で4つのDNA断片を適切に連結することも可能である(1)。In-Fusionクローニング法はハイスループット(HTP)な系にも有用であり、ハーバード大学医学部(2)やスタンフォード大学医学部(3)、オックスフォード大学(4)などのHTPプロジェクトでも活躍している。
In-Fusion HD Cloning Plusシリーズは、クロンテック製高正確性PCR酵素「CloneAmp HiFi PCR Premix」および形質転換効率の高いコンピテントセル「Stellar Competent Cells」が入ったオールインワンキットである。
EcoDryは凍結乾燥タイプで、反応時間は37℃ 15分+50℃ 15分である。

In-Fusion反応の概略


 EcoDryタイプの場合は37℃ 15分+50℃ 15分です。
図1. In-Fusionクローニング

  1. 利用するベクターの末端配列に相同な15塩基を、目的遺伝子増幅用プライマーの5'末端に付加し、目的遺伝子をPCR増幅する。
  2. 増幅産物がシングルバンドであればCloning Enhancer処理*1を行い、複数のバンドが見られる場合はゲルから精製*2して、In-Fusion酵素で線状化ベクター*3と結合する(In-Fusion反応:50℃、15分/EcoDryタイプは37℃ 15分+50℃ 15分)。
    製品名に「CE」が付くキットに含まれるCloning Enhancerは、PCR産物をそのままIn-Fusion反応に使用するための独自の前処理試薬である。PCR終了後の反応液に本試薬を加えて30分間インキュベートするだけで、そのままIn-Fusion反応に使用できる。PCR産物の精製ステップが不要となり、試料のロスも少なくなる。
  3. In-Fusion反応液で形質転換を行い、目的クローンをスクリーニングする。
*1 Cloning Enhancerを含むセットが便利です(製品コード 638916~638919)。Cloning Enhancerのみの別売もあります(製品コード 639613~639615)。
*2 精製用カラムNucleoSpinを含むセットが便利です(製品コード 638909~638920、638912~638915)。
*3 線状化ベクターは、制限酵素処理や全長のPCR増幅により調製してください。

▼In-Fusionクローニング製品選択ガイド

In-Fusionプライマーの設計

In-Fusionクローニング用プライマーの設計および目的DNA断片の増幅は、基本的に通常のPCRプライマーの設計、PCR増幅と同じである。唯一の違いは、利用するベクターの末端配列に相同な15塩基を、配列特異的プライマーの5’末端に付加することである(下図参照)。

お手持ちのベクターに対するIn-Fusion用プライマーの設計には、便利なオンラインツール「In-Fusion HDプライマー設計サイト(The Primer Design Tool for In-Fusion HD Cloning Kit)」をご利用ください。
In-Fusion Cloning プライマー設計・注文


▼In-Fusionクローニング製品選択ガイド

内容

In-Fusion HD Cloning Plus
(製品コード 638909)(10回)
5×In-Fusion HD Enzyme Premix20 μl
pUC19 Control Vector, linearized5 μl
2 kb Control Insert10 μl
CloneAmp HiFi PCR Premix*150回
Stellar Competent Cells*2100 μl×10
NucleoSpin Gel and PCR Clean-up*310回

In-Fusion HD Cloning Plus CE
(製品コード 638916)(10回)
5×In-Fusion HD Enzyme Premix20 μl
pUC19 Control Vector, linearized5 μl
2 kb Control Insert10 μl
CloneAmp HiFi PCR Premix*150回
Stellar Competent Cells*2100 μl×10
Cloning Enhancer*450 μl

In-Fusion HD EcoDry Cloning Plus
(製品コード 638912)(8回)
In-Fusion HD EcoDry Mix8 well strip
pUC19 Control Vector, linearized5 μl
2 kb Control Insert10 μl
CloneAmp HiFi PCR Premix*150回
Stellar Competent Cells*2100 μl×10
NucleoSpin Gel and PCR Clean-up*310回

*1 高正確性PCR酵素
*2 形質転換効率の高いコンピテントセル
*3 PCR産物精製用スピンカラム
*4 PCR産物をそのままIn-Fusion反応に使用するための前処置試薬

保存

In-Fusion HD EcoDry Mix:デシケーター内で室温保存
NucleoSpin Gel and PCR Clean-up:室温
Stellar Competent Cells:-80℃
その他:-20℃

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注意事項
  • 弊社の取扱い製品はすべて研究用として販売しております。ヒト、動物への医療、臨床診断用には使用しないようご注意ください。また、食品、化粧品、家庭用品等として使用しないでください。
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