GenomeWalker™キット

  • PCR法でゲノムDNAを迅速にウォーキング
  • エキソン-イントロン接合部やプロモーター、その他あらゆる調節因子のクローニングに理想的
  • 未知の配列をすばやく決定
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
CLN 636405 Z6405N Universal GenomeWalker™ 2.0
  • 労働安全衛生法
  • 安全データシート(SDS)添付
  • ライセンス
構築3回 & 80 walks ¥139,100
説明書・データシート・ベクター情報
CLN 638901 Z8901N GenomeWalker™ Human Kit
20 walks ¥139,100
説明書・データシート・ベクター情報
CLN 639201 Z9201N Advantage® 2 Polymerase Mix
  • ライセンス
100回 ¥35,700
説明書・データシート・ベクター情報
CLN 639202 Z9202N Advantage® 2 Polymerase Mix
  • ライセンス
500回 ¥151,200
説明書・データシート・ベクター情報
CLN 639206 Z9206N Advantage® 2 PCR Kit
  • ライセンス
100回 ¥60,900
説明書・データシート・ベクター情報
GenomeWalker KitsはPCR法に基づくシンプルな方法により、EST(expression sequence tag, 発現配列タグ)などの既知配列からスタートして、ゲノムDNAの上流または下流へウォーキングを行える。GenomeWalkerでは長距離PCRを用いるため、各ウォーキングで最高6 kbまでのゲノムDNAが得られる(図1)。得られた配列から新たなプライマーを作製してウォーキングを繰り返すだけで、簡単にウォーキング範囲を広げることができる。
GenomeWalker Universal GenomeWalker2.0
本製品はあらゆる生物種のゲノムからGenomeWalker用ライブラリーを構築するためのキットである。Universal GenomeWalker2.0(製品コード 636405)は従来製品のGenomeWalker Universal Kit(製品コード 638904;終売)に、高純度ゲノムDNA抽出キットNucleoSpin tissue(製品コード 740952.10).、制限酵素による消化後のDNA断片の精製用スピンカラムNucleoSpin Gel and PCR Clean-Up(製品コード 740609.50)およびPCR酵素Advantage 2 PCR Kit (製品コード 639207)をセットした便利なキットである。Universal GenomeWalker 2.0は遺伝子特異的プライマーを別途用意するだけで、ライブラリー構築3回と80 walkの反応を行うことができる。

GenomeWalker™ Human Kit(製品コード638901)
本製品はあらかじめアダプターが連結されたヒトゲノムDNA断片のライブラリー 4種類を含むHuman Genome walking用キットである。製品に含まれるライブラリーは高純度の高分子量ゲノムDNAから構築されている。DNAは4種類の制限酵素により個別に消化後、独自設計されたGenomeWalker Adaptorが連結されている。それぞれのキットには、各ライブラリーごとに、walking 20回、1st PCR反応150回およびNested PCR反応300回に必要な試薬類が含まれる。

GenomeWalker Universal Kit(製品コード 638904)およびGenomeWalker Human Kit(製品コード 638901)にPCR酵素およびDNA精製キットは含まれない。遺伝子特異的プライマーセットおよびLong PCR用の耐熱性DNAポリメラーゼミックスは別途用意する。Advantage 2 Polymerase Mixまたは同PCR Kitの使用をお勧めする。


図1. GenomeWalker法

用途

  • Genomic DNA walking
  • プロモーターや調節領域の同定
  • エキソンジャンクションのマッピング
  • トランスポゾンやウイルスの挿入位置同定
  • Zinc finger nucleaseやTAL effector nucleaseなどによるゲノムDNA改変の確認
  • ゲノムDNAのクローニング
  • 次世代シーケンサーによるマッピング

内容

Universal GenomeWalker 2.0(製品コード 636405)
・Four Restriction Enzymes (Dra I, EcoR V, Pvu II & Stu I)
・Corresponding Restriction Enzyme Buffers
・Positive Control Human GenomeWalker Library
・Adaptor Primer 1 (AP1)
・Nested Adaptor Primer 2 (AP2)
・GenomeWalker Adaptor
・Positive Control tPA Primer 1 (PCP1)
・Positive Control tPA Nested Primer 2 (PCP2)
・T4 DNA Ligase
・Ligation Buffer
・Positive Control Human Genomic DNA
・NucleoSpin Tissue(製品コード 740952.10)
・NucleoSpin Gel and PCR Clean-Up(製品コード 740609.50)
・Advantage 2 PCR Kit(製品コード 639207)

GenomeWalker Human Kit(製品コード 638901)
Dra I GenomeWalker DNA Library
EcoR V GenomeWalker DNA Library
Pvu II GenomeWalker DNA Library
Ssp I GenomeWalker DNA Library
・Adaptor Primer 1 (AP1)
・Nested Adaptor Primer 2 (AP2)
・Positive Control Primer 1 (PCP1)
・Positive Control Nested Primer 2 (PCP2)

保存

-20℃

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