microRNA ISH Optimization Kit (FFPE)

  • Double DIG標識 miRCURY LNA microRNA Detection Probeと最適化バッファーにより高感度、高特異性
  • ハイスループットにも個々のmicroRNA解析にも適応
  • プロトコールは、1日で終了
  • 専用装置は不要
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
EXQ 339451 E30001 microRNA ISH Optimization Kit 1 (FFPE)
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1 Kit ¥320,000
旧製品コード 90001 説明書・データシート・ベクター情報
EXQ 339452 E30002 microRNA ISH Optimization Kit 2 (FFPE)
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1 Kit ¥320,000
旧製品コード 90002 説明書・データシート・ベクター情報
EXQ 339453 E30003 microRNA ISH Optimization Kit 3 (FFPE)
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1 Kit ¥320,000
旧製品コード 90003 説明書・データシート・ベクター情報
EXQ 339454 E30004 microRNA ISH Optimization Kit 4 (FFPE)
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1 Kit ¥320,000
旧製品コード 90004 説明書・データシート・ベクター情報
EXQ 339455 E30005 microRNA ISH Optimization Kit 5 (FFPE)
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1 Kit ¥320,000
旧製品コード 90005 説明書・データシート・ベクター情報
EXQ 339456 E30007 microRNA ISH Optimization Kit 7 (FFPE)
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1 Kit ¥320,000
旧製品コード 90007 説明書・データシート・ベクター情報
EXQ 339457 E30008 microRNA ISH Optimization Kit 8 (FFPE)
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1 Kit ¥320,000
旧製品コード 90008 説明書・データシート・ベクター情報
EXQ 339458 E30009 microRNA ISH Optimization Kit 9 (FFPE)
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1 Kit ¥320,000
旧製品コード 90009 説明書・データシート・ベクター情報
EXQ 339450 E30000 microRNA ISH Buffer Set (FFPE)
1 Set ¥87,000
旧製品コード 90000 説明書・データシート・ベクター情報
EXQ 339459 E30010 microRNA ISH Buffer and Controls Kit
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1 Kit ¥224,000
旧製品コード 90010 説明書・データシート・ベクター情報

Exiqon社Webサイト

製品説明

miRCURY LNA microRNA ISH Optimization Kit (FFPE)は、ホルマリン固定パラフィン包埋(FFPE)組織サンプルを用いたmicroRNAのin situハイブリダイゼーション(ISH)実験のセットアップおよび最適化に必要な全ての試薬類を含んだキットで、double DIG-labeled miRCURY LNA microRNA Detection Probe、ISH Bufferと試薬類を含んでいます。
本キットは、5´末端および3´末端の両方が標識されたdouble DIG-labeled miRCURY LNA microRNA Detection Probeを使用することにより、microRNAの高感度で特異性の高い検出が可能です。各microRNA LNA Probeは、ISH実験に最適化されており、さまざまな組織で検証されています。

本キットは、microRNAの細胞内および細胞成分内分布や空間的発現を含む、さまざまな研究に利用でき、ハイスループットISH解析や各microRNA分布研究にも有効です。
Licensed from Roche Diagnostics GmbH

組織的microRNAプローブ、コントロールプローブ、Buffer、Proteinase Kを添付

miRCURY LNA microRNA ISH Optimization Kit(8種類)の各キットには、組織特異的miRCURY LNA microRNA Detection Probeに加えて、5’DIG-labeled U6 control probeおよびdouble DIG-labeled scrambled probe、ハイブリダイゼーションバッファー、Proteinase Kが含まれています。5’DIG-labeled U6 control probeは、ほとんどの組織で発現しているU6 snRNAをターゲットとしており、ISH実験開始時のポジティブコントロールとして使用します。一方、scrambled probeはネガティブコントロールとして使用できます。
各キットに含まれる組織特異的なLNA microRNA probeは様々な組織を用いて検証されており、ISH実験のセッティングおよび最適化に利用できます。用いる組織タイプにどのキットが適しているかを選ぶために表1を参照してください。また、表2には、各キットに含まれる組織特異的LNA microRNA probeのリストとターゲットmicroRNAの発現細胞の例を示しています。

図1.miRCURY LNA microRNA ISH Optimization Kit (FFPE)の原理
組織切片をProteinase Kにより処理した後、DIG標識LNAプローブをターゲットmicroRNAに特異的にハイブリダイズさせる。その後、Alkaline phosphatase (AP)標識anti-DIG抗体を加え、NBT-BCIP発色とNuclear Redでの対比染色を行う。

表1.miRCURY LNA microRNA ISH Optimization Kit 各キットでバリデーションされた組織リスト
バリデーション
済み組織
キット番号とターゲット microRNA
Kit 1 (miR-1) Kit 2 (miR-21) Kit 3 (miR-122) Kit 4 (miR-124) Kit 5 (miR-126) Kit 7 (miR-145) Kit 8 (miR-205) Kit 9 (miR-223)
筋肉
腎臓
肝臓
結腸
子宮頸
心臓
乳腺
肺がん
結腸直腸がん
乳がん  
腎臓がん
子宮頸がん
精巣がん
食道がん
細胞の種類 筋細胞 細胞種は異なる 肝細胞 神経細胞 内皮細胞 平滑筋細胞 基底細胞 顆粒球

表2. 各キットに含まれるプローブと検出対象となるmicroRNAが発現している細胞例
キット プローブ  miR-発現細胞例 画像
Kit 1 miR-1 Skeletal muscle cells, myocytes, myocardiocytes View image
Kit 2 miR-21 Cancer-associated fibroblasts, some immune cells View image
Kit 3 miR-122 Hepatocytes View image
Kit 4 miR-124 Neurons View image
Kit 5 miR-126 Endothelial cells View image
Kit 7 miR-145 Smooth muscle, vascular smooth muscle (pericytes), myoepithelial cells View image
Kit 8 miR-205 Basal keratinocytes, myoepithelium, SCC cancer cells View image
Kit 9 miR-223 Myeloid, granulocytic, and monocytic compartments of the hematopoietic system View image

使用例


図1.マウス心臓でのmiR-1検出
miRCURY LNA microRNA ISH Optimization Kit 1を用いてマウス心臓FFPE切片のmiR-1検出を行った。NBT-BCIP(青)で染色、Nuclear Red(赤)で対比染色を行った。


図2.大腸腺癌でのmiR-21検出
miRCURY LNA microRNA ISH Optimization Kit 2を用いて大腸腺癌FFPE切片のmiR-21検出を行った。NBT-BCIP(青)で染色し、Nuclear Red(赤)で対比染色を行った。

内容

miRCURY LNA microRNA ISH Optimization Kit (FFPE) (製品コード 90001~90009)
・LNA microRNA probe, double-DIG labeled
・LNA scrambled microRNA probe, double-DIG labeled
・LNA U6 snRNA probe, 5’ DIG-labeled
・microRNA ISH buffer (2×)
・Proteinase-K(凍結乾燥品)
(スライド400枚用)


microRNA ISH Buffer and Controls Kit(製品コード 90010)
・LNA scrambled microRNA control probe (5`- and 3`-DIG-labeled)
・LNA U6 snRNA control probe, 5`-DIG-labeled
・microRNA ISH buffer (2×)
・Proteinase K(凍結乾燥品)
(スライド400枚用)

miRCURY LNA microRNA ISH Buffer Set (FFPE) (製品コード 90000)
・microRNA ISH buffer (2×), 25 ml
・Proteinase K(凍結乾燥品), 12 mg
(スライド1000枚用)

表3. 各ISHキット製品の構成内容と単品販売製品リスト
製品名 製品コード 価格(税別) 製品構成内容
ターゲット検出プローブ
ネガティブコントロール
ポジティブコントロール
Buffer
ProK
LNA microRNA probe, double-DIG labeled
LNA scrambled microRNA probe, double-DIG labeled
LNA U6 snRNA probe, 5’ DIG-labeled
microRNA ISH buffer (2×)
Proteinase-K(凍結乾燥品)
microRNA ISH Optimization Kit (FFPE) ※1
90001~90009
microRNA ISH Buffer and Controls Kit ※1
90010
¥224,000
-
microRNA ISH Buffer Set (FFPE) ※2
90000
¥87,000
-
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LNA microRNA probe, double-DIG labeled ※3
610000~689999-360
¥118,000
-
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Scramble-miR, 5'-DIG and 3'DIG labeled ※3
699004-360
¥113,000
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U6, hsa/mmu/rno, 5'-DIG labeled ※3
699002-340
¥78,000
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※1. スライド約400枚分の試薬が含まれます
※2. スライド約1,000枚分の試薬が含まれます
※3. プローブ製品は単品でも販売しています。単品販売場合のプローブ容量は1 nmolです。

保存

LNA Probe、Proteinase K:-20℃
ISH Buffer:4℃
miRCURYおよびLNAはExiqon社のトレードマークです。

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