細胞の浸潤を蛍光法で高感度に検出

Cell Invasion Assay Kit

  • 細胞の浸潤性を蛍光法により高感度に検出
  • 簡便でハイスループットに適したプロトコール
  • 再現性があり、定量的アッセイで様々な接着細胞、浮遊細胞でアッセイが可能
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
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ベクター情報
参考
資料
PCI PK-CA577-K912 D28546 Cell Invasion Assay Kit (BME, 8 μm, 96-well)
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100回 ¥98,000
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PCI PK-CA577-K913 D28547 Cell Invasion Assay Kit (BME, 8 μm, 24-well)
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24回 ¥92,000
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PCI PK-CA577-K914 D28548 Cell Invasion Assay Kit (laminin, 8 μm, 96-well)
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PCI PK-CA577-K915 D28549 Cell Invasion Assay Kit (laminin, 8 μm, 24-well)
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PCI PK-CA577-K916 D28550 Cell Invasion Assay Kit (collagen I, 8 μm, 96-well)
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PCI PK-CA577-K917 D28551 Cell Invasion Assay Kit (collagen I, 8 μm, 24-well)
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PCI PK-CA577-K918 D28552 Cell Invasion Assay Kit (collagen IV, 8 μm, 96-well)
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PCI PK-CA577-K919 D28553 Cell Invasion Assay Kit (collagen IV, 8 μm, 24-well)
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製品説明

細胞の遊走、浸潤は、血管新生、胚発生、免疫応答など、様々な細胞内プロセスにおいて重要な役割を果たしており、細胞内プロセスの変化によって引き起こされる血管疾患、腫瘍形成および転移、アテローム性動脈硬化症、関節炎および認知障害などの病態に関与している可能性がある。
Cell Invasion Assay Kitは、細胞の浸潤を簡単な操作で高感度に検出するキットである。
本製品はボイデンチャンバー(Boyden chamger)を用いており、8 μmのメンブレンインサートにBasement Membrane Extract(BME, growth factor-reduced and endotoxin-free)、laminin、Collagen I、Collagen IVをコーティングした96ウェル、24ウェルの製品が用意されている。様々な物質の刺激に応答して細胞外マトリクスに浸潤しメンブレンを通過した浸潤細胞を蛍光試薬で染色し、蛍光プレートリーダーで測定する。本製品は操作が簡便で、ハイスループットアッセイにも適している。

内容

Cell Invasion Assay Kit (BME, 8 μm, 96-well)(製品コード PK-CA577-K912)の場合
Cell Invasion Chamber1 枚(Top Chamber, Bottom Chamber, Plate Coverから構成)
Basement Membrane Solution1 ml×4
Control Invasion Inducer1.5 ml
Cell Dissociation Solution10 ml
Wash Buffer100 ml×2
Cell Dye1 ml

保存

-20℃、遮光保存。 (小チューブのバイアルは使用する前に軽く遠心してから、キャップを開ける。)
表1.細胞タイプによるキットの選択
Cell Type Cell Migration/Chemotaxis Assay Kit Cell Invasion Assay Kit
  3 μm 5 μm 8 μm 8 μm
Invasive and Non-invasive breast cancer cell lines (human):
e.g. MDA-MB-231, MCF7
Invasive fibrosarcoma cell line (human):
e.g. HT1080
Non-Invasive fibroblast cell line (mouse):
e.g. NIH3T3
Endothelial cells: e.g. HUVECs
Endothelial Cells: e.g. HDMECs/HMVECs, HMECs
Myofibroblasts: e.g. Hepatic Stellates N/A
Leukocytes, Neutrophils
Lymphocytes, Macrophages, Monocytes
Epithelial cells, fibroblasts

細胞浸潤アッセイの原理

アッセイの原理
  1. 細胞懸濁液を上部チャンバーに添加し、下部チャンバーには化学誘引物質を含む(または含まない)培地を入れる。
  2. 浸潤細胞が半透過性ポリカーボネート膜を通りぬけ、膜底面に付着する。非浸潤細胞は上部チャンバーに残る。
  3. 上部チャンバーの外側に付着した浸潤細胞は、多孔質膜から剥がれて下部チャンバーの培地の底に移る。
  4. 下部チャンバーから浸潤細胞を剥がして蛍光染色し、蛍光プレートリーダーにて定量する。
表2.製品のラインナップ
プレート表面処理 励起/吸光波長(nm) ウェル数 製品コード
Collagen I 485/530 24 PK-CA577-K917
100 PK-CA577-K916
Collagen IV 485/530 24 PK-CA577-K919
100 PK-CA577-K918
Laminin 530/590 24 PK-CA577-K915
100 PK-CA577-K914
Basement Membrane 530/590 24 PK-CA577-K913
100 PK-CA577-K912

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