Pluripotency Check Kit(マウスiPS細胞分化多能性チェックキット)

  • 内在性・外来性指標遺伝子の発現をRT-PCRで測定し、マウスiPS細胞の分化多能性を確認
  • 16種類のプライマーのセット
  • プライマーセットに加えてRNA抽出、RT-PCRに必要な試薬を含むキットと別売りプライマーセットを用意
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
CLN 631965 Z1965N Pluripotency Check PCR Kit
  • 労働安全衛生法
  • 安全データシート(SDS)添付
  • ライセンス
1 Kit ¥111,200
説明書・データシート・ベクター情報
CLN 631966 Z1966N Pluripotency Check PCR Primer Set
25回×16 ¥59,700
説明書・データシート・ベクター情報
幹細胞やiPS細胞が分化多能性を保持しているかどうかを知ることは、幹細胞/iPS細胞研究において非常に重要なステップである。指標遺伝子検出用の評価済みのプライマーのセット(1)、あるいはこのPrimer Setに加え、必要な試薬も含むキットを用いることで、細胞の分化多能性の有無をRT-PCRで迅速に調べることができる。

Pluripotency Check PCR Kitは、幹細胞やiPS細胞の分化多能性の有無をRT-PCRで確認するために必要な試薬(RNA抽出、RT-PCR)やプライマーをすべて含んでいる。16種類のForwardおよびReverse Primerのセットにより、多能性幹細胞に特異的に発現している9種類の遺伝子と2種類のコントロール用遺伝子を検出できる(1;表1)。増幅サイズの異なるプライマーを用いることで、内在性の遺伝子発現と導入した遺伝子の発現を容易に区別でき、キット中のいくつかの遺伝子のプライマーまたは全プライマーを使用して分化多能性を調べることができる。

Pluripotency Check PCR Primer Setは別売りのプライマーセットであり、PCR用試薬などを含まない。

表1. 分化多能性チェック用 PCRプライマーセット
Primer Set 増幅サイズ Primer Set 増幅サイズ
Oct3/4(Total)1 485 bp Klf4(Total)1 739 bp
Oct3/4(Endogenous)1 224 bp Klf4(Endogenous) 206 bp
Nanog(Total)1 364 bp Ecat11 164 bp
Nanog(Endogenous)1 223 bp ERas1 210 bp
Sox2(Total)1 193 bp Esg11 376 bp
Sox2(Endogenous)1 297 bp Rex11 287 bp
c-Myc(Total)1 228 bp ß-Actin(Control) 603 bp
c-Myc(Endogenous)1 170 bp GAPDH(Control) 568 bp
Endogenous:内在性遺伝子
Total:内在性遺伝子+導入遺伝子


図1. マウスES細胞の分化多能性の確認
Total RNAをマウスES細胞株ES-E14TG2より抽出し、cDNA合成、PCR増幅をおこなった(操作手順はPT5086-2に従う)。
M:100 bp DNAマーカー レーン1:Oct3/4(Total) レーン2:Oct3/4(Endogenous) レーン3:Nanog(Total) レーン4:Nanog(Endogenous) レーン5:c-Myc(Total) レーン6:c-Myc(Endogenous) レーン7:Sox2(Total) レーン8:Sox2(Endogenous) レーン9:Klf4(Total) レーン10:Ecat1 レーン11:ERas レーン12:Esg1 レーン13:Rex1 レーン14:GAPDH (control) レーン15:β-Actin (control)
Klf4(Endogenous), data not shown.

内容

Pluripotency Check PCR Kit
(製品コード 631965 )
・Pluripotency Check PCR Primer Set(25回×16)(製品コード 631966)
・NucleoSpin RNA II(10反応分)
・SMART MMLV Reverse Transcriptase(8,000 units)(製品コード 639523)
・Titanium Taq PCR Kit(30回)(製品コード 639211)

保存

NucleoSpin RNA II Kit:室温
その他の試薬:-20℃

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