衛生指標菌を菌群レベルでスクリーニング

CycleavePCR® Bacteria Screening Kit

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR CY208 CY208 CycleavePCR® Bacteria Screening Kit
  • ライセンス
  • バルクなど特別対応可能
50回(ENT、BS各25回) ¥91,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

タカラバイオでは、食品製造現場で細菌の迅速検査を行うためのPCRキットとして、Bacteria Screening PCR Kit(製品コード RR114A)を販売している。このキットでは、衛生指標菌と呼ばれる菌群の16S rRNA遺伝子をターゲットとして増幅したPCR産物を、アガロース電気泳動に供することで菌群検出を行っているが、さらに迅速な検出を行うため、リアルタイムPCR用のキットとして構築したものがCycleavePCR Bacteria Screening Kitである。
本製品では、リアルタイムPCR装置Smart Cycler SystemまたはSmart Cycler II Systemを使用して、サイクリングプローブ法で菌群をリアルタイムに検出する。16S rRNA遺伝子をターゲットとしてENTプライマーおよびENTプローブ (FAM標識) により大腸菌やサルモネラ菌を含む腸内細菌科の菌群を、またBSプライマー*およびBSプローブ (ROX標識) によりセレウス菌を含むバチルス属、黄色ブドウ球菌を含むスタフィロコッカス属の菌群を検出する。増菌培養と組み合わせることにより、検体中に含まれるわずかな数の生菌も短時間で検出できる。
リアルタイム検出を行うため電気泳動が不要であり、迅速に結果が得られる(約40分)。

*本キットで使用するプライマーは、Bacteria Screening PCR Kitでも使用しているENTおよびBSプライマーです。これらのプライマーで増幅するPCR産物の内部配列を検出するサイクリングプローブを使用しているのでBacteria Screening PCR Kitと同等の反応特異性を示します。

内容

(ENT, BS 各25μl反応×25回)
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl)12.5 μl (50回分)
Tli RNase H II*1 (200 U/μl)25 μl (50回分)
2×Reaction Mixture*2625 μl (50回分)
ENT Primer Mix (5 μM each)37.5 μl (25回分)
BS Primer Mix (5 μM each)37.5 μl (25回分)
ENT Probe*3 (25×conc.)25 μl (25回分)
BS Probe*3 (25×conc.)25 μl (25回分)
ENT Positive Control10 μl (10回分)
BS Positive Control10 μl (10回分)
dH2O1 ml
10% Chelex Solution (キレックス溶液)12 ml

*1 Thermococcus litoralis由来の耐熱性RNase H
*2 dNTP mixtureを含む。
*3 蛍光標識Probeは、遮光に留意すること。

輸送

10% Chelex Solutionのみ:室温輸送
その他のコンポーネント:-20℃輸送

保存

10% Chelex Solutionのみ:4℃保存
その他のコンポーネント:-20℃保存

プローブ標識と検出チャンネル


プローブ蛍光色素 検出チャンネル 増幅サイズ
ENT FAMおよびクエンチャー Ch 1 約420 bp
BS ROXおよびクエンチャー Ch 4またはCh 3* 約380 bp

* Smart Cycler System (Smart Cycler Software Version 1.2または2.0) を使用した場合、BSの検出にはCh 4を使用する。
Smart Cycler II System (Smart Cycler Software Version 2.0) を使用した場合、BSの検出にはCh 3を使用する。

キット以外に必要な試薬、機器(主なもの)

  1. リアルタイムPCR装置
    Smart Cycler System
    Smart Cycler II System (製品コード SC200N) など
  2. Smart Cycler専用反応チューブ (製品コード SC910A, SC910C)
  3. 卓上型Smart Cycler専用遠心機
  4. ヒートブロック(99℃まで温度を上げられるもの)
  5. 1000 μl、200 μl、20 μl、10 μl 各マイクロピペット
  6. マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)

  遺伝子検出・検査 関連試薬の選択フローをご利用ください

分野別の試薬選択フロー
手法別の試薬選択フロー

「検査(PCR/ELISA)」関連のお役立ち情報専用ページもご参照ください。

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注意事項
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