黄色ブドウ球菌の検出

CycleavePCR® Staphylococcus aureus (DnaJ gene) Detection Kit

メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別) 特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR CY228 CY228 CycleavePCR® Staphylococcus aureus (DnaJ gene) Detection Kit
  • ライセンス
50回 ¥69,000
説明書・データシート・ベクター情報

製品説明

黄色ブドウ球菌(Staphylococcus aureus)は、ヒトや動物の皮膚、消化管に存在する常在細菌の一種で、食品中で増殖するとエンテロトキシンと呼称される毒素を産生し、食中毒の原因となる。

本キットは、ハウスキーピング遺伝子の1つであり、菌種間でも多様性を持つDnaJ遺伝子をターゲットとして、黄色ブドウ球菌をリアルタイムPCR装置を用いて特異的に検出するキットである。
本キットによる増幅にはHot Start PCR用酵素、TaKaRa Ex Taq HSを使用しており、反応液調製時などサイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を防ぐことができ、高感度の検出が可能になる。
増幅産物の検出にはサイクリングプローブ法を採用している。サイクリングプローブ法は、RNAとDNAからなるキメラプローブとRNase Hの組み合わせによる高感度な検出方法で、増幅中や増幅後の遺伝子断片の特定配列を効率良く検出することが出来る。プローブは片方の端が蛍光物質で、もう片方の端が蛍光物質の発する蛍光を消光する物質(クエンチャー)で標識されている。このプローブは、インタクトな状態ではクエンチングにより蛍光を発することはないが、配列が相補的な増幅産物とハイブリッドを形成した後にRNase HによってRNA部分で切断されることにより、強い蛍光を発するようになる。この蛍光強度を測定することで、増幅産物量をモニターすることが出来る。
本キットには、黄色ブドウ球菌のDnaJ遺伝子に由来する増幅産物を検出するためのFAM標識プローブ、ならびにインターナルコントロールDNAとインターナルコントロール由来増幅産物を検出するためのROX標識プローブが含まれている。二波長を同時にモニタリングすることで、一本のチューブでDnaJ遺伝子の検出と、インターナルコントロールDNAの検出による偽陰性のモニターが可能である。リアルタイムPCRによる検出なので電気泳動が不要であり、迅速に結果が得られる。

本製品は、岐阜大学大学院医学系研究科病原体制御学分野 教授 江崎孝行先生のご協力のもとに開発いたしました。

内容

(25 μl反応、50回)
1. 2×CycleavePCR Reaction Mix 625 μl
2. S. aureus Primer/Probe Mix(FAM, ROX)*1 5×conc.250 μl
3. dH2O
1 ml
4. S. aureus Positive Control
50 μl (10回分)

*1 蛍光標識プローブを含んでいるため、遮光に留意すること。

保存

-20℃(輸送、保存とも)

キット以外に必要なもの(主なもの)

【機器】
リアルタイムPCR装置および専用チューブ
 Thermal Cycler Dice Real Time System シリーズ(製品コード TP900/TP800など)*2
食品環境検査用ソフトウェア(日本語表示)
または、Thermal Cycler Dice Real Time System Software
 Applied Biosystems 7500 Fast Real-Time PCR System(Life Technologies)
 StepOnePlus Real-Time PCR System(Life Technologies)など
ヒートブロック(95℃まで温度を上げられるもの)

*2 チューブ1本ごとにフラットキャップが付いているキャップ付き0.2 ml 8連チューブをThermal Cycler Dice Real Time System専用として販売している。チューブ間のコンタミネーションリスクを軽減できる。
   0.2 ml 8-strip tube, individual Flat Caps(製品コード NJ600)

【その他】
1,000 μl、200 μl、20 μl、10 μl 各マイクロピペット
マイクロピペット用チップ(疎水性フィルター付)
卓上遠心器
微量高速遠心機(4℃設定可能なもの)

補足資料

Thermal Cycler Dice Real Time Systemシリーズ「食品環境検査用ソフトウェア」を使用の場合に便利な“Quick Manual”を用意している。
キットに添付の取扱説明書とあわせて使用する。
Thermal Cycler Dice Real Time System II(製品コード TP900)
Thermal Cycler Dice Real Time System Lite(製品コード TP700)

CycleavePCRキットによる定性解析(PDF、989 K)

  遺伝子検出・検査 関連試薬の選択フローをご利用ください

分野別の試薬選択フロー
手法別の試薬選択フロー

「検査(PCR/ELISA)」関連のお役立ち情報専用ページもご参照ください。

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