カラムによる混入DNAの除去で迅速にtotal RNAを精製
- 培養細胞、動物組織、植物組織、微生物などから効率よくtotal RNAを精製
- 酵素処理ではなくカラムで混入DNAを除去する新世代RNA精製キット
- 細胞溶解液の清澄化とゲノムDNA除去を1カラム1ステップにまとめた効率的作業
- 2-ME, TCEPの添加不要な新Lysis Bufferを使用
製品を簡単にご説明した動画もご用意しています。動画はこちら
2025年4月製造以前のLot（Lot. 250501-001以前のもの）では、誤植のある簡易手順書（September 2023,Rev.01）が同封されている可能性がございます。
この誤植のある簡易手順書では、5 Wash and dry silica membraneにおいて、Bufferの名称およびその使用量が誤って記載されております。
このため、【英文説明書が製品に同梱されている場合】同封の【英文説明書が製品に同梱されていない場合】本ウェブページ添付の英文説明書（User manual）に記載されている正しい操作手順に従って、作業していただくようお願いいたします。
この誤植のある簡易手順書では、5 Wash and dry silica membraneにおいて、Bufferの名称およびその使用量が誤って記載されております。
このため、【英文説明書が製品に同梱されている場合】同封の【英文説明書が製品に同梱されていない場合】本ウェブページ添付の英文説明書（User manual）に記載されている正しい操作手順に従って、作業していただくようお願いいたします。
製品説明
NucleoSpin RNA Plusは、迅速に効率良くゲノムDNAを除去できるNucleoSpin gDNA Removal Columnを採用した新世代のtotal RNA精製キットである。このキットではDNaseによる酵素処理の代わりに、NucleoSpin gDNA Removal Columnによる混入DNA除去を行うため、各種細胞、組織から20分という短時間でDNAを除去されたtotal RNAが精製できる。
試料とする細胞や組織を2-MEやTCEPの添加不要な新規Lysis Bufferを用いて溶解し、NucleoSpin gDNA Removal Columnによりライセートの清澄化とゲノムDNAの除去を行い、NucleoSpin RNA Plus Columnによりtotal RNAの精製を行う。
* RNA integrity number
図1. gDNA Removal Columnによる効率的なゲノムDNA除去
NucleoSpin RNA Plus（青）と他社製品（赤）を使用して5×106個のHeLa細胞、20 mgマウス腎臓からtotal RNAを精製した。精製溶液中の残存ゲノムDNA量をqPCR法により測定した結果、NucleoSpin RNA Plusを用いて得られたRNA溶液ではより高いCt値を示し、より効率良くゲノムDNAが除去されることが示された。
試料とする細胞や組織を2-MEやTCEPの添加不要な新規Lysis Bufferを用いて溶解し、NucleoSpin gDNA Removal Columnによりライセートの清澄化とゲノムDNAの除去を行い、NucleoSpin RNA Plus Columnによりtotal RNAの精製を行う。
| 原理 | シリカメンブレン法（2カラム） |
| 形状 | ミニスピンカラム |
| サンプル量 | 培養細胞： ～1×107 cells バクテリア： ～109 cells 酵母： ～108 cells 動物組織： ～30 mg |
| 精製サイズ | ＞200 bases |
| 回収量 | 40～60 μg（HeLa細胞、5×106 cells） 80～100 μg（マウス肝臓、20 mg） 40～70 μg（マウス腎臓、20 mg） 30～60 μg（マウス脾臓、5 mg） |
| A260/280 | 1.9～2.1 |
| A260/230 | 1.8～2.5 |
| 標準的RIN＊ | ＞9 |
| 溶出液量 | 30～120 μl |
| 精製時間 | 20分 |
| 結合容量 | 200 μg |
図1. gDNA Removal Columnによる効率的なゲノムDNA除去
NucleoSpin RNA Plus（青）と他社製品（赤）を使用して5×106個のHeLa細胞、20 mgマウス腎臓からtotal RNAを精製した。精製溶液中の残存ゲノムDNA量をqPCR法により測定した結果、NucleoSpin RNA Plusを用いて得られたRNA溶液ではより高いCt値を示し、より効率良くゲノムDNAが除去されることが示された。
内容
・Lysis Buffer LBP
・Binding Solution BS
・Wash Buffer WB1
・Wash Buffer WB2 (Concentrate)
・RNase-free H2O
・NucleoSpin gDNA Removal Column（黄リング）
・NucleoSpin RNA Plus Column（青リング、Collection Tubes付）
・Collection Tubes (2 ml)
・Collection Tubes (1.5 ml)
・Binding Solution BS
・Wash Buffer WB1
・Wash Buffer WB2 (Concentrate)
・RNase-free H2O
・NucleoSpin gDNA Removal Column（黄リング）
・NucleoSpin RNA Plus Column（青リング、Collection Tubes付）
・Collection Tubes (2 ml)
・Collection Tubes (1.5 ml)
保存
室温
本製品以外に必要な試薬、機器（主なもの）
試薬
・96～100％エタノール
器具
・1.5 mlマイクロチューブ
・ピペットチップ（滅菌済）
・ピペット
・高速遠心器
・サンプル破砕用ホモジェナイザー
・96～100％エタノール
器具
・1.5 mlマイクロチューブ
・ピペットチップ（滅菌済）
・ピペット
・高速遠心器
・サンプル破砕用ホモジェナイザー
操作手順
用途
- 培養細胞、動物組織、植物組織、微生物からのRNA精製
- 精製RNAはリアルタイムRT-PCR、ノーザンブロット、アレイ解析などに使用可能
NucleoSpinはマッハライ・ナーゲル社の登録商標です。
Protocols
関連製品・受託
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