Pfu Aminopeptidase I

N末端からexo型にアミノ酸を遊離する超耐熱性酵素
製品コード メーカー
略称		 製品名 容量 価格（税別） 特記事項 説明書、CoA
データシート
ベクター情報		 参考資料 カート
Takara Code
7336

TKR

タカラバイオ（株）
 Pfu Aminopeptidase I
0.5 mg ￥55,000
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7336
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4℃以下 乾燥状態

由来

Escherichia coli carrying plasmids encoding the Pyrococcus furiosus aminopeptidase I gene.

反応

タンパク質のN末端からexo型にアミノ酸を遊離する。広い基質特異性を有するが、プロリンのα-アミノ基側のペプチド結合は加水分解しない。Co2+イオンにより顕著に活性化する。

活性の定義

75℃、pH8.0において、1分間に1 μmolのLeucine-p-nitroanilideを分解する酵素活性を1 Uとする。

形状

凍結乾燥品〔50 mM Tris-HCl緩衝液（pH8.0）溶液0.5 mlを凍結乾燥〕

一般的性質

分子量：  37,438（アミノ酸配列）
36,000～37,000（SDS-PAGE）
等電点：  4.6～4.65
阻害剤：  EDTA（0.1 mM添加で完全に阻害）
至適pH：  5.5～6.0（Co2+非存在下、90℃）
5.5～8.0（20 μM Co2+存在下、90℃）
至適温度：  80℃（Co2+非存在下、pH6.0）
95℃（20 μM Co2+存在下、pH6.0）
温度安定性： 90℃、pH8.0、Co2+非存在下4時間処理後に65%の活性を保持している

反応温度およびCo2+イオンの有無による相対力価

反応温度のPfu AP I活性測定値への影響
温度（℃） 活性（U/mL）
　CoCl2 なし
紺色菱形		20μM CoCl2
ピンク色正方形
372.383.12
504.737.70
759.3349.88
909.4669.56

基質特異性

（20 μM Co2+存在下、95℃、pH6.0）
基質反応時間（hr）遊離アミノ酸（%）
Leu-Enkephalin
（Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu）		3.5Tyr103.5
Gly215.6
Phe105.9
Leu102.4
Angiotensin
（Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu）		 1.0Asp102.2
Arg94.8
Val92.6
Tyr104.1
Ile6.2
Substance P
（Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2）		3.5None
[D-Ala2, D-Leu5]-Enkephalin
（Tyr-D-Ala-Gly-Phe-D-Leu）		 3.5Tyr106.3
D-Ala58.7
Gly40.3
Phe0
D-Leu0
Insulin B-chain
（Phe-Val-Asn-Gln-His-Leu-Cys[SO3H]-Gly-Ser-
His-Leu-Val-Glu-Ala-Leu-Tyr-Leu-Val-Cys[SO3H]-
Gly-Glu-Arg-Gly-Phe-Phe-Tyr-Thr-Pro-Lys-Ala）		 1.0Phe35.5
Val20.5
His20.9
Leu25.5
Gly14.0
Ser9.4
Glu7.6
Ala7.3

使用上の注意

タンパク質をサンプルとする場合、CM化など化学的手法での変性が必要である。
PVDF膜上のタンパク質には作用しない。

製品選択ガイド（プロテアーゼ＜アミノ酸配列解析など＞）

注意事項
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