Taq抗体と結合させたTaKaRa Ex Taq®

TaKaRa Ex Taq® Hot Start Version

  • ●反応用バッファー添付+dNTP
メーカー
略称
製品コード TaKaRa
Code
製品名 容量 価格(税別)
キャンペーン価格
特記事項 説明書
データシート
ベクター情報
参考
資料
TKR RR006A RR006A TaKaRa Ex Taq® Hot Start Version
  • タカラバイオPCR酵素 20周年記念サマーキャンペーン
  • バルクなど特別対応可能
250 U ¥31,500
¥22,050
2014/07/14~
2014/08/29

説明書・データシート・ベクター情報
TKR RR006B(A×4) RR006B(A×4) TaKaRa Ex Taq® Hot Start Version
  • タカラバイオPCR酵素 20周年記念サマーキャンペーン
  • バルクなど特別対応可能
1,000 U ¥101,000
¥70,700
2014/07/14~
2014/08/29

説明書・データシート・ベクター情報

※色文字での表示は、キャンペーン価格およびそのキャンペーン期間です。

製品説明

TaKaRa Ex Taqは、LA PCRの原理を応用した3’→5’exonuclease活性(proof reading活性)を持つ耐熱性DNA Polymeraseである。通常のPCR条件下において、従来のTaq DNA Polymeraseと比べて、高い増幅効率、低いエラー率で高感度のPCRを実現できる。
本製品で使用しているTaKaRa Ex Taq HSは、抗Taq抗体とTaKaRa Ex Taqを混合したもので、ホットスタートPCR用の酵素である。高温に加熱するまでは抗Taq抗体が酵素に結合しポリメラーゼ活性を抑えているため、サイクル前のミスプライミングやプライマーダイマーに由来する非特異的増幅を防ぐことができる。抗Taq抗体はPCRの最初のDNA変性ステップで変性するため、特別な変性ステップは必要なく、従来のPCR条件で使用できる。

内容

(250 U)
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) 50 μl
10×Ex Taq Buffer (20 mM Mg2+ plus) 1 ml
dNTP Mixture (各2.5 mM) 800 μl

保存

-20℃

形状


20 mMTris-HCl (pH8.0)
100 mMKCl
0.1 mMEDTA
1 mMDTT
0.5%Tween 20
0.5%Nonidet P-40
50%Glycerol

添付dNTP Mixture*

濃度各2.5 mM
形状水溶液(ナトリウム塩)pH7~9
純度各98%以上


* dATP、dCTP、dGTP、dTTPの等モル混合物で、希釈せずにそのままPCR反応に用いることができる。

活性の定義

活性化サケ精子DNAを鋳型/プライマーとして用い、下記の活性測定用反応液中にて74℃において、30分間に10 nmolの全ヌクレオチドを酸不溶性沈殿物に取り込む活性を1 Uとする。

活性測定用反応液組成

25 mMTAPS緩衝液 (pH9.3、25℃)
50 mMKCl
2 mMMgCl2
0.1 mMDTT
各200 μMdATP・dGTP・dCTP
100 μM[3H]-dTTP
0.25 mg/ml活性化サケ精子DNA

純度

●10 Uの本酵素と0.6 μgのλ-Hind III分解物とを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●10 Uの本酵素と0.6 μgのsupercoiled pBR322 DNAとを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。
●10 Uの本酵素と0.6 μgのλDNAとを74℃、1時間反応させてもDNAの電気泳動パターンに変化は起こらない。

用途

Hot Start Polymerase Chain Reaction (PCR)法によるDNA増幅

PCR産物について

TaKaRa Ex Taq HSを用いて増幅したPCR産物のほとんどは、3’末端にAが1塩基付加されている。したがって、そのPCR産物をそのままT-Vector[pMD20(製品コード 3270)、pMD19 (Simple)(製品コード 3271)など]にクローニングすることができる。また、末端平滑化およびリン酸化を行って、平滑末端のベクターにクローニングすることも可能である。

PCR検定

●λDNAを鋳型としたPCR反応(増幅産物 20 kb)において良好な増幅が見られることを確認している。
●ヒトゲノムDNAを鋳型としたβ-globinのPCR反応(増幅産物 17.5 kb)において良好な増幅がみられることを確認している。

一般的なPCR反応液量(Total 50 μl)

TaKaRa Ex Taq HS(5 U/μl) 0.25 μl
10×Ex Taq Buffer(Mg2+ plus) 5 μl
dNTP Mixture(各2.5 mM) 4 μl
Template <500 ng
Primer 1 0.2~1.0 μM
(final conc.)
Primer 2 0.2~1.0 μM
(final conc.)
滅菌蒸留水 up to 50 μl
● 弊社では、さまざまな特長をもつPCR酵素を用意しています。
  用途に応じて選択してください。
⇒ PCR Enzyme選択フローチャート
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