Anti-Human von Willebrand Factor (vWF)

Application1：ELISAによるvWF V8プロテアーゼ断片に対する各クローンの反応性

図 ヒト血漿フォンビルブランド因子V8プロテアーゼ断片のFPLC Mono-Qカラムによる分離（A）と断片I、II、IIIに対する各モノクローナル抗体のELISAでの反応（B）
（A）精製ヒト・フォンビルブランド因子をV8プロテアーゼ固定化アガロースカラムに循環させ限定分解した後に、FPLC Mono-Qカラムに吸着後、NaCl濃度グラジェントにて溶出し、断片I、IIおよびIIIを精製した。
（B）（A）で得た断片I、II、IIIをマイクロプレートに自然吸着しブロッキングののちに各モノクローナル抗体（10 μg/ml）を反応させ、抗マウスIgGパーオキシダーゼ標識物およびオルトフェニレンジアミン基質により反応を確認した。

Application2：サンドイッチEIA法

図 フォンビルブランド因子のプロテアーゼ消化とサンドイッチEIA法による各モノクローナル抗体の反応
3種のモノクローナル抗体（VW33-5、VW28-1、VW92-3）精製IgGを96穴マイクロプレートに固相化し、4種のパーオキシダーゼ標識モノクローナル抗体（○VW28-1;●VW40-1;□VW53-2;■VW92-3）にてサンドイッチEIAを行った。反応抗原であるフォンビルブランド因子をトリプシン消化により分解するにつれてVW28-1およびVW92-3の反応は減衰していく。またVW92-3モノクローナル抗体の反応はプラスミンによる消化によっても減衰する。

Application3：抗vWF抗体によるvWFへの接着阻害


Application4：Anti Human vWFモノクローナル抗体を用いた組織染色

図 vW28-1	図 vW33-5
図 vW40-1	図 vW1-2

一次抗体：各抗体を200倍希釈（10 ng/ml）
使用組織：ホルマリン固定、パラフィン包埋した｢ヒト扁桃腺組織｣第VIII因子関連抗原陽性コントロールスライド（市販品）
検出方法：ストレプトアビジンｰビオチン法