DNA Ligation Kit

pUC 118 DNAのEcoR I 断片（50 ng、25 fmol）に1.5 kbpのEcoR I 断片（2.5～250 ng、2.5～250 fmol）を加えたDNA溶液（5 μl）を調製した。プロトコールにしたがって、16℃で30分間反応させ、反応液の一部でJM109コンピテントセルを形質転換し、X-Gal、IPTGを含むL-Ampプレート上でコロニーを形成させた。白色コロニー数を計測し形質転換効率を調べた結果を表に示す。また、通常のライゲーション反応でT4 DNA Ligase（製品コード 2011）350 Uを使用して16℃で16時間反応させた場合の効率も併記した。また、本実験に使用したJM109コンピテントセルは6.3 × 10⁷コロニー数/μg pUC 118 DNAの効率である。

表　ベクターを脱リン酸化した場合としない場合の形質転換効率

	DNA Ligation System 30 min		T4 DNA Ligase 16 hr
インサート/ベクター 　　　　　モル比	脱リン酸化 ベクター	リン酸化 ベクター	脱リン酸化 ベクター	リン酸化 ベクター
0.1	1.7 × 106	7.8 × 105	1.6 × 105	4.6 × 105
0.3	5.0 × 106	2.5 × 106	2.0 × 105	1.0 × 106
1.0	1.7 × 107	8.2 × 106	1.8 × 106	1.9 × 106
3.0	2.3 × 107	1.7 × 107	3.1 × 106	5.0 × 106
10.0	2.1 × 107	2.3 × 107	1.9 × 106	1.2 × 107

（白色コロニー数/μgインサートDNA）