DNA Ligation Kit

pUC118 Hinc II/BAP、脱リン酸処理済みベクター（製品コード 3322）100 ng （50 fmol）に2.6～130 ng（0.5～25 pmol）のpBgl IIリンカーd［pC-A-G-A-T-C-T-G］（製品コード 4621P）を加え5 μlとしたDNA溶液を調製した。プロトコールにしたがって、16℃で30分間反応した。この反応液の一部でJM109コンピテントセルを形質転換し、X-Gal、IPTGを含むL-Ampプレート上でコロニーを形成させた。白色コロニー数を計測し、その形質転換効率を調べた結果を表に示す。また、通常のライゲーション反応でT4 DNA Ligase 350 Uを用いて16℃で16時間反応させた結果も併記した。なお、本実験に使用したJM109コンピテントセルは1.5 × 10⁸コロニー数/μg pUC118 DNAであった。

表 リンカーライゲーションにおける形質転換効率

リンカー/ベクター 　　　　　モル比	DNA Ligation System 30 min	T4 DNA Ligase 16 hr
10	2.0 × 106	1.2 × 106
50	8.0 × 106	3.2 × 106
100	3.0 × 107	2.3 × 106
500	2.5 × 107	2.4 × 106

（白色コロニー数/μg pUC118 DNA）