TaKaRa One Step RNA PCR Kit (AMV)
TaKaRa RNA LA PCR Kit Ver. 1.1との感度比較
[方法]
1) サンプルとしてTaKaRa RNA LA PCR Kit Ver. 1.1(製品コード RR012A)に添付のPositive Control RNA(2×10
5 copies/μl)を段階的に希釈し各種の濃度で用い、Standard Protocolに従って反応液を調製する。
2) 下記のプログラムに従って反応を行う。
RNA LA PCR Kit Ver. 1.1
RT反応 : 50℃15分、95℃5 分、5℃5分
反応後、PCR反応液を添加して次の反応に進む。
PCR反応 : 94℃30秒、60℃30秒、72℃1分(30サイクル)
One Step RNA PCR Kit(AMV)
RT反応 : 50℃15分、94℃2分
PCR反応 : 94℃30秒、60℃30秒、72℃1分(30サイクル)
(TaKaRa PCR Thermal Cycler MPを使用)
[結果]
図に示すように、One Step RNA PCR Kit(AMV)は、RNA LA PCRTM Kit Ver. 1.1と同等の感度を示し、5×10
2コピーまでバンドが確認できた。
レーン |
| レーン | |
1: |
Negative control(水) | 5: | 5×103コピー |
2: |
5×100コピー | 6: | 5×104コピー |
3: |
5×101コピー | 7: | 5×105コピー |
4: |
5×102コピー | M: | 100 bp DNA Ladder |
12 μlアプライ
3% アガロースゲル
TaKaRa One Step RNA PCR Kit (AMV)