各種菌体熱抽出液を検体として用いたときのアッセイ例
【反応液の組成】
【PCR反応】
94℃1分、55℃1分、72℃1分のPCRサイクルを35回行った後、最後に72℃10分の伸長反応を行った。
【電気泳動】
| 10×Ex Taq Buffer | 5 μl |
| dNTP Mixture（2.5 mM eath） | 4 μl |
| Primer Mixture | 10 μl |
| Positive Control Template | 10 μl |
| TaKaRa Ex Taq（5 U/μl） | 0.25 μl |
| 菌体熱抽出液 | 5 μl |
| dH2O | 15.75 μl |
| Total | 50 μl |
【PCR反応】
94℃1分、55℃1分、72℃1分のPCRサイクルを35回行った後、最後に72℃10分の伸長反応を行った。
【電気泳動】
| 3％アガロースゲル、5μlを泳動 | ||
| 増幅サイズ | Positive Control Template由来 | ：641 bp |
| O-157抗原合成遺伝子由来 | ：457 bp | |
| ベロ毒素1型遺伝子由来 | ：349 bp | |
| ベロ毒素2型遺伝子由来 | ：112 bp | |
各種菌体熱抽出液をアッセイとしたときの結果
レーン
1：O-157/VT1＋/VT2＋
2：O-157/VT1＋/VT2－
3：O-157/VT1－/VT2＋
4：O-157/VT1－/VT2－
5：O-111/VT1＋/VT2＋
6：O-26/VT1＋/VT2－
7：O-139/VT1－/VT2＋
8：O-1（Negative Control）
M：100 bp DNA Ladder
