TaKaRa 炭疽菌 PCR Detection Kit
電気泳動による検出の実施例
TaKaRa 炭疽菌 PCR Detection Kitを用い、炭疽菌より抽出精製したDNA(1 ng、10 ng)を鋳型としてPCR反応後、電気泳動に供した。
- 【反応液組成】
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5×Reaction Mixture |
10μl |
PA Primers (PA7, PA6) |
4μl |
CAP Primers (M011, M012) |
4μl |
Template |
1μl |
TaKaRa Ex Taq HS |
0.25μl |
滅菌蒸留水 |
30.75μl |
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Total |
50 μl |
- 【PCR条件】
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95℃ |
2 min. |
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95℃ |
15 sec. |
35 cycles |
60℃ |
15 sec. |
72℃ |
30 sec. |
72℃ |
5 min. |
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【結果】
レーン1では、PA、CAPともにインターナルコントロール(IC)のバンドのみが確認された(98 bp, 409 bp)。このことから、反応液に対するコンタミネーションはない。
また、レーン2、3はともにPA、CAP遺伝子陽性であった(211 bp, 591 bp)。
レーン M: |
100 bp DNA ladder |
1: |
Negative Control |
2: |
炭疽菌抽出精製DNA 1 ng |
3: |
炭疽菌抽出精製DNA 10 ng
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(炭疽菌抽出精製DNAは、帯広畜産大学 畜産学部 獣医学科 牧野壮一先生にご恵与いただきました。)
TaKaRa 炭疽菌 PCR Detection Kit