コールドショック発現系について

T7系での発現に問題があった15種類の遺伝子のコールドショック発現系での検討

T7プロモーターによる発現系で発現量や可溶性度に問題があった15種類のヒト遺伝子について、コールドショックベクターの効果を検討した（pCold Iを使用）。
その結果、T7系でまったく発現しなかった6遺伝子について、すべての遺伝子で発現がみられた。
T7系で発現レベルが低かった9遺伝子については、7遺伝子で発現量が増加した。
また、15遺伝子のうち、7遺伝子で可溶性度が向上した。

遺伝子
No.		 分子量
(kDa)		 T7発現系 コールドショック発現系
発現の有無*1 可溶性発現*2 発現の有無*1 可溶性発現*2
1 6.4 × × ○ ×
2 9.0 ○ × ○ △
3 12.6 × × ◎ ○
4 13.4 ○ ○ ◎ ×
5 15.8 × × ◎ ×
6 19.4 × × ◎ ○
7 24.7 △ × ◎ △
8 26.3 × × ○ ×
9 29.8 ○ × ◎ ×
10 32.1 △ × ○ △
11 33.1 ○ ○ ○ ○
12 33.4 ○ ○ ◎ ○
13 33.9 × × ○ △
14 46.3 △ × ◎ ×
15 46.8 △ × ◎ ○

発現の有無*1 可溶性発現*2
◎　CBB染色で強く染色
○　CBB染色で染色 ○　可溶性
△　抗体で染色 △　一部可溶性
×　検出されない ×　不溶性

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