Mighty Cloning Reagent Set (Blunt End)
PCR 反応に用いる酵素の比較
Mighty Cloning Kit (Blunt End) 製品コード 6026
PrimeSTAR HS DNA Polymerase 、
TaKaRa Taq、
TaKaRa Ex Taq、
TaKaRa LA Taq、
TaKaRa Ex Taq Hot Start Versionを用い、λ DNAを鋳型として増幅した1 kbpのPCR産物を、本キットのプロトコールに従ってpUC118
Hinc II / BAPにクローニング後、
E. coli JM109コンピテントセルを形質転換してカラーセレクションを行った。なお、インサートの有無はPCR(プライマー;M13 Primer M4およびRV)によって確認した。
PCRに使用したDNA polymerase |
白色コロニー/青色コロニー (/50 ng pUC118 DNA) |
インサート/白色コロニー |
PrimeSTAR HS DNA Polymerase | 8.9×104 / 4.5×103 | 9 / 10 |
TaKaRa Taq | 1.2×105 / 1.0×104 | 9 / 10 |
TaKaRa Ex Taq | 1.5×105 / 1.0×104 | 10 / 10 |
TaKaRa LA Taq | 8.3×104 / 5.5×103 | 9 / 10 |
TaKaRa Ex Taq Hot Start Version | 8.1×104 / 6.3×103 | 10 / 10 |
※使用したコンピテントセルは3.6×10
8 コロニー/μg pUC118 DNAの形質転換効率を持つ。
Mighty Cloning Reagent Set (Blunt End)