Anti-Human E-cadherin

【方法】

A431（ヒト扁平上皮細胞）・MCF7（ヒト乳ガン細胞）・HepG2（ヒト肝ガン細胞）の3種類の細胞を培養し、1％NP40/PBSで可溶化し遠心した。10⁷ cell/mlの細胞の可溶化物を集めたものを抗原とするサンプルについてSDS-PAGE（5-20％）を行い、PVDF膜にブロッティングした。この膜をブロッキングした後、ヒトカドヘリン抗体（HECD-1）（製品コード M106）（2 μg/ml）800倍希釈液を反応させ、洗浄した。次に、ペルオキシダーゼ標識抗マウスIgG抗体　2000倍希釈液を反応させ、洗浄した。洗浄後の膜にSuperSignal West Femto Maximum Sensitivity Substrate（取扱終了）を加え、5分間放置した。反応終了後、LuminoShot 400Jr（終売）でシグナルを検出した。

【結果】

カドヘリンはA431（ヒト扁平上皮細胞）で最も発現量が多く、HepG2（ヒト肝がん細胞）においては、ほとんど発現が認められなかった。
また、10秒、2分で露光し撮影したが、10秒という非常に短い時間でも発現量の比較が可能であった。

10秒後	2分後
A431 MCF7 HepG2	A431 MCF7 HepG2